必修2基因工程及其应用ppt课件.ppt
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1、2022/12/25,水母,荧光鼠,荧光鱼,荧光斑马鱼,2022/12/25,蓝色妖姬,2022/12/25,你想过吗?,2022/12/25,设想一,能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮?,能否让细菌“吐出”蚕丝?,设想二,能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物?,设想三,基因决定形状定向基因改造设想,经过多年的努力,科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术基因工程。,2022/12/25,基因工程及其应用,第2节,化龙中学 高一生物组,2022/12/25,甲生物,乙生物,新类型,基因工程,2022/12/25,基因工程:即 。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种
2、生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里, 地改造生物的 。,原 理:,操作水平:,结 果:,一、基因工程,基因重组,DNA分子水平,定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。,基因拼接技术或DNA重组技术,定向,遗传性状,2022/12/25,二、基因操作的工具,2022/12/25,1、基因工程的,指“限制性核酸内切酶”(简称限制酶),主要存在于微生物,一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子,已发现的有200多种,作用对象:,磷酸二酯键(脱氧核糖和磷酸连接的键),2022/12/25,限制性内切酶(EcoR)作用过程,2022/12
3、/25,1、被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?,思考:,形成的黏性末端不同,2、不同的限制酶呢?,具有,2022/12/25,2、基因工程的,指“DNA连接酶”,将互补配对的两个粘性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子,2022/12/25,DNA连接酶的作用过程,2022/12/25,DNA连接酶的作用位点是:相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成:磷酸二酯键。,2022/12/25,3、基因的运载体,(2)条件,能够在宿主细胞中复制并稳定地保存,具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接,具有标记基因,便于进行筛选(标记基因,便于进行检测重组质粒是否进入受体细胞),(3)
4、常用的运载体:,质粒、噬菌体和动、植物病毒等,(1)运载体的概念,2022/12/25,标记基因,便于进行检测。,其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.,(4)它们的共同特点是,都有侵染或进入宿主细胞的能力,2022/12/25,第一步:,第二步:,获取目的基因,目的基因与运载体结合,注意:要用同一种限制酶切取目的基因和运载体,并用DNA连接酶连接。,三、基因工程基本步骤,2022/12/25,第三步:,第四步:,将目的基因导入受体细胞,目的基因的检测和表达,1、常用的受体细胞:,大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等,2、常用微生物作受体
5、细胞的原因:,微生物增殖快、代谢快、目的产物多,一般检测:,标记基因是否表达,2022/12/25,大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。,2022/12/25,2022/12/25,?如何让大肠杆菌生产人胰岛素?,从细胞中分离出DNA,2022/12/25,要使目的基因与对应的载体重组, 所需的两种酶是( ) 限制酶 连接酶 解旋酶 还原酶 ,巩固练习,2022/12/25,2.基因工程的正确操作步骤是()
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