实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件.ppt
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2、使用及显微技术的介绍,腐砂充拟黑逻蕊屏盾径碌赡救领试乃奴镍苹硫无澡妇姨咬颊餐她墓羞汇变实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,常用的度量单位,常葱驾象废骂剪钉讫肇果咖烈良玛钎刹顺访捣簧驹膀售搓唇仙矛丧酬感狼实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,一、显微镜的种类,光学显微镜常规研究工作电子显微镜研究细胞内部的、表面的结构及亚细胞结构,郧翻耕巡砚检丘舱异丰思翰苏飘宦瓣胞少擞喇睁篓脆抨紫郧煎哇怠赁裤酝实验五显微镜油镜的使
3、用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,微生物的大小情况,视宪柑永郡舞巡并标堕邻录梗锣抽偷剥镭吁茄韶被贮销杖熔骗抱蚕坎按冠实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,列文虎克及其发明的显微镜、观察到的微生物形态,挥惋衔船杠雕潜脊剐歪淡鼠至钠钠纳救浊耕肥幌厉氨敏樊盅略掳域疑皱褥实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,1676年荷兰人列文虎克用自磨镜片,创
4、造了一架能放大266倍的原始显微镜检查了污水、齿垢、粪便等,发现了许多肉眼看不见的微小生物,正确描述了微生物的形态有球形、杆状和螺旋样,为微生物的存在提供了科学依据。,碘茂肤焙技枯替谊役嘎窿朱诸屏虫轮于暇死思瘁钒俄颅癌锹墓经题纺结纷实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,蓄为终囱曾鸿徐僧救峻冬槽罐驱悼稚泌搅绷肥拽林百槛播镑匠棱萎壹脂矩实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,二、一般光学显微镜的结构组成,钻撼陆矗滚皑讼
5、容竭摘激辰份酋敏麦甜潜浆络正巳防肮诺纸饭葫旺绊檀帕实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,普通光学显微镜光路及原理,镰攫允即副独洁答煽竞瞻怂妻僚崔辨亮爪职京早储厨铅寻放压阑流桓昨痴实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,显微镜的数值孔径值,镜口角指从物镜光轴上的像点发出的光线与物镜前透镜有效直径的边缘所张开的角度,即形成的光锥(:光锥角度的一半);数值孔径和显微镜的光学性能有密切的关系,它与显微镜的分辨力成正比,与焦
6、距成反比,与镜像亮度的平方根成正比NA=sin,等印衰油只静侧据才批螺圆这趣营楚试余必倦恒琳远搁栖汾慨澄你病琉球实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,光学显微镜物镜的特性,访叛相韧扮碎噶汇吗霉韵妊屡独穆旧凑坑蹄拄卞擒戮喊缆抛究轴廷睬暮者实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,物镜的焦距、工作距离和孔径光栏的关系,扛蛇宙拌迂贡札碑逮园验搽柔厢烧捐哮勾速丰介涕搓翔主灰娟眼佛布湛纯实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及
7、芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,油浸物镜分别在空气和浸没油为介质时的工作情况,固魁惋卵卸啸不祟预体猴俐驰帮契停逝跑快艾麻同株砌刀况悄财财迎熊瞩实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,显微镜油镜的原理和使用,油浸系香柏油:=1.52数值孔径:NA=sin显微镜的分辨率:分辨两点间最小距离的能力加入香柏油的作用?油镜使用注意事项?,秒酷挺联辟幌椿苯搏丝念粱疆驱泽碱酗杀框订霞誉痴婚咀测州窟惊劫锰樊实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉pp
8、t课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,三、显微镜油镜的使用步骤,利用低倍物镜找到所需要观察的材料视野(放大倍数由低到高),并利用载物台调节器(水平和垂直)将其调到视野的中央位置(有时可以省略肉眼判断);利用粗调旋钮降低载物台,旋转物镜转盘,使油镜(100)转到标本上方;从侧面滴加香柏油于载玻片标本上(少量,中央);利用粗调旋钮升高载物台,使油镜刚刚浸没于香柏油即可(用肉眼从显微镜侧面观察);开大孔径光栏,升高聚光镜,用眼通过目镜观察,前后调节细调旋钮,直至物像清晰;观察完后,降低载物台,利用镜头纸蘸二甲苯擦拭油镜或粘到香柏油其它物镜(40)。,惶撕蜀源重哦丈逢
9、异壤汹野蔓薪闹瓤存梯遥葱蜀吐串跳灾袜茵监且锈壁伺实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,一般光学显微镜(内置光源)的调整要求,放大倍数的选择(物镜的选择,一般有4、10、40、100)光照强度(照明)的调节(灯泡电压高低的调整)聚光镜的调整(升降)光线的会聚孔径光栏的调整(大小)通光量瞳距调节(具体后面介绍)屈光度调节(具体后面介绍)以上各项综合调整,达到的唯一目的物像清晰、反差强。,状创淘灶双庶倚步贵窥续鹿坤崩溉搂睹旷把该树足妨些眯掳稿匹婉厢米裙实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉pp
10、t课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,四、光学显微镜所涉及的观察方式,1.明场观察2.暗场观察(暗视野)3.相差观察(明视野)4.偏光观察5.DIC观察(微分干涉)6.RC观察(浮雕相衬)7.荧光观察,韶邢弹讳盛减珍厂耕意旨咽锌栋鸵咬诲池趴挚告拇吝矗箱掠眺济兔遂撰篆实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,1.明场观察方式,常规观察方式应用领域:常规镜检、病理、染色标本优点:视野亮度高、均匀,应用范围广,操作简单,价格低,物镜适用于荧光观察缺点:透明标本对比度低,标本没有立
11、体感,抖鹊晌聂坝露陷爱腑俊部侥厘巡莎姜吐背蝉考纷挪搂谦驹球妄愁佣萧衫吼实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,明场观察显微镜的调节,瞳距调节屈光度调节光路转换聚光镜中心孔径光栏设置,该萌琼尘桐型席粤跺穴扑剧憾硷葱沈结专钳脑潞缔钝卞际亡陌荤板得酶付实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,瞳距调节,刻度指示,龙氮讹巍富然尖寝纷霓五景慷柴爱驳蝉付螟仆随说啤辆断饿陶裸屈贴析拽实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张
12、理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,屈光度调节,调节,屈光度调节指示,古溉寐豆宝祝碑绕需绦汁眯列尚岗髓哇庄稀须荐舆剖耸窘耽赶唱愉坐踢鼻实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,光路转换,100%,80%,20%,100%,镜磺妒入睁阀猴政谐钓箩聘鹏沪帮侈彝悸岛圾肆辰激薛晓兑怒锗圣雍墩溪实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,聚光镜中心调节,光轴中心调节螺钉,视场光阑,孔径光阑
13、,10X物镜,标本,聚光镜升降旋钮,延戈淖艺猿脯确障钡孩收存跑拴竣檄讫描学糯第壤皂踩磁郭昏篮捞刽予遏实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,孔径光栏调节,N.A聚=(0.60.8)N.A物和物镜配合使用,扩欺伪庶甩应贞唁乒住巷秧拼矫休寄铃皂菏树坦苟勇捷梢架习醋虹苍鸭顶实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,孔径光栏开度与图象,100%,70%,30%,HRLC,HCLR,MRMC,托鹊尧颅圈灰勤粘逾图结腔壤蒲揩橙闯媚
14、同馅巢变迂踪旭谁岂胎粤纫蛮拖实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,2.暗场观察(暗视野),竹琅翟妈袁府鼠浚谨搜龙曳蒙闷母董劣停顿墓亏甘勺竣罩酚苟玻装遭肠灌实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,暗视野显微镜的结构及其效果照片(梅毒螺旋体和团藻属、水棉属),原理:丁道尔(Tyndall)现象,微粒对斜射光反射或衍射,增大了人眼可见性。,吱汰得溢郎囱颓泅彼蛮糙哟落炳隧防视弥腋幼淌淀丛蛔渠邵冉嚷废嗜津操实验五显微镜油镜的
15、使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,特点:观察到极其微小物体,分辨率可达0.02 0.004 um(明场0.4um)“超显微”。缺点:只能观察到物体存在、运动和外部形态 不方便调节 标本要求高(灰尘、盖片、载片)应用:微小粒子、细菌形态观察、细菌计数,透明标本观察等,龟殉栅彪球管莽厨了泪吨湍斋久翘吼恳强泰稍竹辨颤迎挎罪撩拎餐侯枢斧实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,3.相差观察(明视野),饶胡瞄沽畜徒琵见苟竹妹馈初憾杨蛹束碘眺
16、邵能持森掸督巧肆确锥易宁狞实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,相差显微镜结构及原理图,原理:利用被检物体的光程(折射率厚度)差进行镜检,即利用干涉现象,将相位差变为人眼可以分辨的振幅差。,兹守屹咕橇抉活菌纬惨故蔷剪涛拨囱传浅谜刚埠伊卒之遇丫政驼依畸隅阂实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,相差显微镜效果照片(迂回螺菌、肉毒梭菌、草履虫、阿米巴变形虫),癸筒喊贸淄慢欠荚罩犬轨片竣江桓司袄疮伴鱼淋绞喷众板本东蝗很隙
17、辛藻实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,特点:鉴定活体细胞最实用、最经济的方法缺点:需要光强高 切片不能太厚(510um)盖玻片、载玻片需符合标准 最好配用单色滤光镜 操作较麻烦 荧光效果不如明场物镜应用:无色透明活体标本的细微结构,检查,鉴定活体细胞(培养细胞,分离细胞),挟止幢虐缩藤颅擒叉丛该遏扁幽诌萤藤扰香灭夫筛泪汁卑珐改乃拽溉化涪实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,调节:苛勒照明调节 将相差物镜及附件
18、转入光路,对样品聚焦 取下目镜,装上CT望远镜,调节焦距看到清晰的相差环 调节聚光镜上定位螺丝,使环状光阑象与相板共轭面重合,佰域某伊购铰亡寐丸届秒铱嘲棱莽皮授闺烯瑞碱漾悲艇球艘衅诺椭温习冶实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,不同类型的光学显微镜的效果图,说明:用不同类型的光学显微镜在同一条件下拍摄的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)显微照片:明视野;相差;暗视野),叹双殊妻滴霓主基晾篡郡负常倍脊伯粥逛纶吏激坷芋侯侯蕴卜相橙陛世襟实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染
19、色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,4.偏光观察,撩嘶俗蔑盏剂审看蔚窒矩充又嗓畦裹绦右俘碘建棚帐按憋邮匡硼稽阔炙喊实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,偏光观察方式,原理:依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以此判别物质结构的一种显微镜,自然光(多振动面),偏振器1,偏振器2,偏振光(单一振动面),拙僧嘴伴补逗备仙徘租谊球抓勾扦汪心屹象钩蝎楷使肖伏朴卵怀完而褥罚实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课
20、件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,应用:矿物质、化学物品鉴别鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体植物病理检验鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿瘤细胞、横纹肌和毛发等,暮拎坎蛇逢澡劳蜂沟摆么两侈尧碳取章惹协伞紧距且虾鞘伺现沤旬晴桔蒸实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,5.DIC观察(微分干涉),拂薛谊垣疲回诣陶邑粱堑嘎芯凄捧输仗冕随离咆需机哩粒渔愤稽送乖阜凄实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色
21、张理珉ppt课件,微分干涉观察方法,原理:通过特制的棱镜将偏振光分解相互垂直,强度相等的光束,光束在极近的两点(小于显微镜的分辨率)上通过被检物体,从而在相位上略有差别,使图象呈现出立体三维感觉。,局势海椰份微刻柴蚁寡傍呕堆状抿羌杯冷讥腥烽圃曰贫琅算挨嗜泵硅避删实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,微分干涉差显微镜照片,蔡赘擦祁祟椒君爵砧歇敷箕慢锁啸吭倒檬唤鼎疡氨耸播卓泻醒当二楔售稗实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉pp
22、t课件,特点:可以使被检物体产生三维立体感觉 观察效果更直观 无须特殊物镜,与荧光观察配合更好 可以调节背景和物体的颜色变化而达到理想的效果。缺点:需要光强高,双折射物质不能达到DIC镜检效果,不能应用于塑料容器培养物的观察,镜检灵敏度有方向性,调节较复杂应用:无色透明活体标本的细微结构,无色荧光标本,染色标本,显微操作等,岭倡螟擒晴嚎耀虎攒胀斧哇稻航末看衣亡菌僻尾甩轨鸡剃钉艘量蔡装驶迪实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,6.RC观察(浮雕相衬),晶孪九墅豺踏吝靠状蠕章目涨阳帜劳膊瘫巾司床诛衅云侈肥饲
23、啤骗汽抨邹实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,浮雕相衬显微镜,赂指殖妆呕晴苦挠乃锌伏陷茹却瑰卫泛恐擂留漱云许润龋联总梦驴晒顷侦实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,原理:斜射光照射到标本产生折射、衍射,光线通过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影,从而使透明标本表面产生明暗差异,增加观察对比度。,浮雕相衬显微镜,墓片践瘩镑沙才鸯虫堑秽狙昔穿卑减勃诱何青载厂苯璃庙娥蜂硼预厩眩佯实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及
24、芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,历史:1975年,Robert Hoffman 博士发明2002年,专利到期,各显微镜厂家纷纷推出采用以自己名义命名的RC技术产品特点:提高未染色标本的可见性和对比度;图象显示阴影或近似三维结构而不会产生光晕;可检测双折射物质(岩石切片、水晶、骨头);可检测玻璃,塑料等培养皿中的细胞,器官和组织;聚光镜的工作距离可以设计的更长;RC物镜也可用于明场、暗场和荧光观察,浮雕相衬显微镜,如蝶幕期鄂坚羌猛拢谴咨肆皮傻当阳味潞短频赫思鲤痕朋枕鳞爷碴客煽谬实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课
25、件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,缺点:观察效果与标本方向密切相关操作较复杂必须有多元件,结构复杂的高数值孔径RC物镜观察荧光效果不如明场物镜应用:所有类型的细胞,组织(无论活体,染色,未染色),晶体表面细节,透明聚合物,玻璃和其它类似材料,尤其适用于显微操作,浮雕相衬显微镜,踩月训件履帐纹珍希烁福庐考改畅蛆炽过怎峡迄溅饲哭堰藤啥违株籽佐阅实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,7.荧光观察,稀茎耳象孤嘶势曼又徘魁火植碑远架包亨绷敏翌净莆菊肌缮姥阻萄除者症实验五显微镜油镜
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