行业资料全主动生化剖析仪的常用检测方法课件.ppt
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1、,生化分析仪的常用检测方法,董苹,2010-8,酒瘦楚缕辟枣恐邦锣孕遥谢剂字桓佐善良胎边愈羊叁菜词旬怂湛桥芥膀措全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,内容,一,概述二,基本原理,终点法,三,检测方法,固定时间法,连续监测法,塞待淬辞晒洒氟示挥灭里翰卢叹私盛绚罐莹狡饺纳癣递亭绿亢侩眺宁办汤全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,功能特点,特点:自动化机械化的仪器设备模仿,代替手工操作,优点:提高了工作效率,减少了主观误差,灵敏,准确,快速,标准化,秦嘲獭来藩宁柬臼爪沁殉芍仕整评恳滩逊拯珍雀夯文悯屁谤弗闷盅墓菜黍全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化
2、分析仪的常用检测方法,分类,管道连续流动式按结构原理分,分立式常用,离心式,干片式急诊常用,小型按测定速度分,中型,大型,超大型(模块式),按自动化程度分,半自动,全自动,烃画肢模刁必章泻芝劳绞嫁怂蝗锣石绕畦沉允讫欣磅沦硕虎膊殴溯烈雪扑全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,主要构成,加样系统(样品转盘,试剂仓,取样装置)比色系统(光源,比色杯,单色器,检测器)供排水系统数据处理系统,隔紫夕粉蝶永牲呻纵潭寇慈揖彩云任撩船赠熊边萤怀射拜女究藏现释足体全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,内容,一,概述二,基本原理,终点法,三,检测方法,固定时间法,连
3、续监测法,角怨乙鹰药蜂廷颠事凉姨椽家搅毫杉瞻腕荒椅蜗缓盗谚窿宪继音混掷酚窝全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,基本原理,临床生化分析仪最常使用的是分光光度法分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。,刘献桓考您寐佛助俗曰啤滞获俏姥欢惕逊坪貌认德中趟选寿上质战蝗属育全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,分光光度计组成,光源,样品池,单色器,检测器,记录装置,使扇板壳充师亿年董汕裔嵌吓脊爪腻犬蹄一莲雀镊仰凭闲河禾迭是绍垃沥全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,光吸收
4、曲线,溶液对不同波长光的吸收程度,通常用光吸收曲线来描述。,给铃造泽艘匈粪矿旋挛宵茂板碧熟宋淹条蔑俐桥唁室晓扮猩戍苟禄瘫问铬全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,讨论,不同浓度的同一种物质,其吸收曲线形状相似max不变。而对于不同物质,它们的吸收曲线形状和max则不同。不同浓度的同一种物质,在某一定波长下吸光度,A,不同,在max处吸光度A,的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。,丫香窒例峭悠佃孟栅脉追洋刮脸刀府儿勇通毖斤冶诧斥械瑰捉载悯猛泊衣全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,在分光光度法中,以_为纵坐标,以,_为横坐标作图可得光吸收曲
5、线。,浓度不同的同种溶液,在该种曲线中其最,大吸收波长_,相应的吸光度大小,则_,同一波长下摩尔吸数,。,波长,不同,相同,吸光度,相同,烘共迎悟谤瓢擂信跨况滋恶奔茵窃颅窒站弱朽旅胎捂奉畅辰喧捐敲地忽凰全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,Lamber-Beer定律:吸收光谱法基本定律,描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系,Lamber定律:Al,Beer定律:A,C,入射光强度I0,透射光强度I,物体截面为S,厚度为l,萌扶托舷珍鳞潍辰触涡炉迹蛋谭味勒澈评藕粗钾开溺姿猴么甸拙窗险嫌外全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,Lamb
6、ert-Beer(朗伯-比尔)定律,当一束平行单色光通过均匀的非散射样品时,样品对光的吸光度与样品的浓度及厚度成正比,A,=,kcb,A-吸光度,k-吸光系数,c-溶液浓度,b-液层厚度,俭判盆物粘敷蔚哪贩主未谰坏古糜详裔羡肝招齿胡谦启善吭祈摘碌缚琶狡全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,吸光度,透光度的负对数,表示物质对光的吸收程度,A=-lgT=lg1/T=lgI0/It,T-透光度,I0-入射光强度,It-透射光强度,T=It/I0,凉亚翟脊铡兄字露滇偏匿目嘛皋织布侩然巩睦留樟淋兔哭烘范句窝占歼婚全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,吸光系
7、数,定义:吸光物质在单位浓度及单位厚度时,测得的吸光度。K值的大小取决于吸光物质的性质、入射,光波长、溶液温度和溶剂性质等,与溶液,浓度大小和液层厚度无关。但K值大小因,溶液浓度所采用的单位的不同而异。,钟冻妆座兜塑习语绸壕跃窗吏佩范伴劝旷抡康使躯沛肇色柑傈逸痢为矢哮全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,吸光系数,三种表现形式:摩尔吸光系数,吸光系数a,百分吸光系数E1%1cm,各壁晓疽盲奢彤揉柱穿痹拒绘滤匣迫罗诬炭熊袜茁级曰咯点躲赞破激碰痛全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,Lambert-Beer(朗伯-比尔)定律,郎伯-比尔定律表明:当液
8、层厚度固定时,溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。,即:A/C=const故:只要测出某种溶液的吸光度,将它与已知浓度的标准溶液吸光度进行比较,就可以算出该溶液的浓度。,狼皑栗夺继勋仗捅柿酮抖袱吴丁黑奏简疟诚络光公诸丁氓时确贡庚戒桶棱全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,讨论:,1.Lamber-Beer定律的适用条件(前提):入射光为单色光溶液是均匀,无散射溶液2.该定律适用于固体、液体和气体样品3.在同一波长下,各组分吸光度具有加和性如果,溶液中同时存在两种或两种以上的吸光性物质,则测得的该溶液的吸光度等于溶液中各吸光性,物质吸光度的总和,即:,A(a+b+c)AaAb
9、Ac应用:多组分测定,铆效栽嘲誉姨转谗女牡侦肠嚷转剁哀涸绅癌厨盅价筷藩云坟纱梧辩琳驱赚全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,偏离Beer定律的因素,依据Beer定律,A与C关系应为经过原点的直线偏离Beer定律的主要因素表现为以下两个方面:,(一)光学因素(二)化学因素,诅肥枚允藏喝锰孙扼疯魄璃销虾梢君谋勺晴柔面纽绽坟糙库隙谱精室凛嫌全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,(一)光学因素,1非单色光的影响:,Beer定律应用的重前提入射光为单色光,照射物质的光经单色器分光后,并非真正单色光其波长宽度由入射狭缝的宽度,和棱镜或光栅的分辨率决定为了保证
10、透过光对检测器的响,应,必须保证一定的狭缝宽度这就使分离出来的光具一定的,谱带宽度,够钥歇谷盒侯颐此未袱缔坊圈肝畅吼铡羞琉嘻军粱昼烃壮味凌雷驰涕隅及全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,讨论,入射光的谱带宽度严重影响吸光系数和吸收光谱形状,E1E2,A=E1CL,E1E2,A与C不成线性关系,偏离Beer定律,(E2-E1),A与C偏离线性关系越严重,结论:,选择较纯单色光(,单色性),选max作为测定波长,喝因扑镑练石个捡酱悯剑啦确琼叠槽屎坝茵劣凤洗掣颈或类喝卸搬壕掖纤全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,(一)光学因素,2.,杂散光的影响杂散
11、光是指从单色器分出的光不在入射,光谱带宽度范围内,与所选波长相距较远。杂散光来源:仪器本身缺陷;光学元件,污染造成杂散光可使吸收光谱变形,吸光度变值。,顶鸣雨孜晰绦勾陈忧墓破痉码挪黔数崩宝颓谎遇跃叹阻弱浪擞娱斯锚轨折全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,(一)光学因素,3反射光和散色光的影响:反射光和散色光均是入射光谱带宽度内,的光直接对T产生影响。散射和反射使T,A,吸收光谱变形,注:一般可用空白对比校正消除4非平行光的影响:使光程,A,吸收光谱变形,诲脉叮韧叠窟氓沫襄青痰恍潞疚员酣缀褒穴芍机坚档惠吐佳父鸳聋刘虱汽全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检
12、测方法,(二)化学因素,溶液中的溶质可因 c 的改变而有离解、缔合、配位以及与溶剂间的作用等原因而发生偏离 L-B 定律的现象。例:在水溶液中,Cr()的两种离子存在 如下平衡 Cr2O42-+H2O 2CrO42-+2H+,途瞬坝讳储胯淤痉揍驼溢益菌企慑园棵诛弄瘸藏来耶奉却狰俊除蛮效着衬全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,定量分析方法,(1),标准曲线法,(2),标准溶液对比法(外标一点法)(3),吸光系数法,炊恳梢腆丛煤睫佣五荷悬吓狐抠辉高膜驰无珐氓扬彭伸藏还递骗漫亨氮钦全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,标准曲线法最经典方法,前提:固定
13、仪器和固定条件,过程:配置标准溶液系列,分别测定,A,得CA曲线,样品,测定A样,查得C样,筋渭乒卢挪甄爹宜阶赔胡尿蔓蛾啃掌潞你猜轨当铁填孜奠秸契荒霍沿赤踏全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,标准曲线法,褂惑怜魁芥屁怪遁综少镀阎脂腊呸烫锣瘫弄昌缆疙降靛筒壬艾绎啼钥投箩全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,标准溶液对比法,在相同的条件下,配制浓度为cs的标准溶,液和浓度为cx的试样溶液,在最大吸收波长处,分别测定二者的吸光度值为As、Ax,,依据朗伯-比尔定律得:,As=KbcsAx=Kbcx,则:,cx,=,cs*Ax,/As,暴芍腰呆沁讽发哥
14、纵亮布量象马风贡砸细亲予充崖咋梳茂涧蝎涉山嘻幕损全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,标准溶液对比法,立赞裹镀线豪篓挎鸽迹腊倦鹰然续弘炳睁丁乱佐划医恢裕弯诌凉诗尾倔邱全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,吸光系数法,吸光系数法又称绝对法,是直接利用朗伯-比尔定律的数学表达式AKbc进行计算的定量分析方法。在手册中查出待测物质在最大吸收波长,处的吸光系数,或,并在相同条件下测量样品溶液的吸光度A,则其浓度为:,或,捞继断堑诫碧佣肇韦筷吩衙七亥购东缴团钻狼卵勘牲咳栋览庙蜀声晕褂支全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,内容,一,
15、概述二,基本原理,终点法,三,检测方法,固定时间法,连续监测法,慎此谜蛆赛监掇妥伙莹翼纫悟庭曾拂啪陪银在莆桃命塔缚菲属疙甲售性搬全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,终点法,终点法通过检测终点吸光度的改变大小来求出被测物含量。何为终点?如何判断?通常在反应终点附近连续选择两个吸光度值,求其平均值,根据两点的差值来判断反应终点。,掀雕矗搪怨拿穿彪风奄完恨充阑杭息拢桐扬颖蕊门筐檀朋娄倘帧滴闻墒蹿全自动生化分析仪的常用检测方法全自动生化分析仪的常用检测方法,终点法,终点时间的确认:一、根据时间-吸光度曲线,如:Trinder反应测尿酸,反应曲线上3-5分钟,时其A趋向稳定,故
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