酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的性质比较.ppt

酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的来源和性质比较,目录,酸性蛋白酶的来源与性质,碱性蛋白酶的来源与性质,3,蛋白酶的定义、分类与来源,1,2,两类蛋白酶的性质比较,4,1 蛋白酶,（1）定义：蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。,（2）蛋白酶分类,按其水解多肽的方式分为：内肽酶和外肽酶按其活性中心和最适pH值分为：丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶按其反应的最适pH值分为：酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶,（3）蛋白酶的来源,蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶，主要由霉菌、细菌，其次由酵母、放线菌生产。,2 酸性蛋白酶,（1）定义：是一类适合在酸性条件(pH15)下水解蛋白质的酶类。酸性蛋白酶是指蛋白酶具有较低的最适pH，而不是指酸性基团存在于酶的活性部位，酸性蛋白酶的最适PH从1到5。从酶的活力-PH曲线分析，在酶的活性部位中含有一个或更多的羧基。这一类蛋白酶中研究最彻底的是胃蛋白酶。,酸性蛋白酶来源,酸性蛋白酶主要来源于动物的脏器(胃蛋白酶等)和微生物分泌物。产酸性蛋白酶的微生物菌种有很多，如米曲霉、黑曲霉、芽孢杆菌、根酶、青霉、微小毛霉等,酸性蛋白酶性质,酸性蛋白酶是一类具有复杂理化性质的化合物，不同微生物菌种分泌的酸性蛋白酶虽具有一些共同的性质，但在底物特异性、抑制剂、激活剂等方面均存在一定的差异，在最适pH、最适温度、pH耐受性以及耐温上各不相同。不同金属离子及其浓度对酸性蛋白酶的影响也不同。,（1）酸性蛋白酶的pH适应性 酸性蛋白酶的最适 pH 为 2.5 5.0，但不同微生物的酶稍有差异（2）酸性蛋白酶的温度适应性 酸性蛋白酶的适宜温度 为 30 50，最适作用温度为40 左右。在温度较低时，酶活性随温度的上升而增大，在温度达到酶的最适温度后，酶活力随温度升高而急剧下降，失活很快。一般50 以下可保持稳定，但随产酶微生物菌种不同而有所差异。,酸性蛋白酶性质,酸性蛋白酶性质,（3）酸性蛋白酶的抑制剂 酸性蛋白酶活性中心含有2个天冬氨酸残基，因此大多数抑制剂可通过酯化作用而迅速使之钝化，使酸性蛋白酶失活。酸性蛋白酶一般对重氮化合物、十二烷基硫酸钠（SDS）以及1，2-环-3-对硝基苯氧基丙烷（EPNP）敏感，而对异丙氟磷酸（DFP）、对氯汞苯甲酸（CMB）及乙二胺四乙酸（EDTA）不敏感。（4）金属离子对酸性蛋白酶的影响 Ag+对酸性蛋白酶有轻度抑制作用，而Cu2+、Mn2+对其有激活作用,3 碱性蛋白酶,（1）定义：是一类最适pH在9-11范围内的蛋白酶，因他们的活性中心大多含有丝氨酸，所以又称丝氨酸蛋白酶。碱性蛋白酶广泛应用于洗涤剂、食品、医疗、酿造、丝绸、制革等行业。,（2）碱性蛋白酶的来源,碱性蛋白酶主要存在于细菌、放线菌和真菌中。微生物（菌种）地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜碱性芽孢杆菌、灰色链霉菌、费氏链霉菌等,碱性蛋白酶性质,大多数微生物碱性蛋白酶作用于肽链的中间，生成二个肽。除酶本身的氨基酸残基外，不具有特定的活性基团，酶发挥作用是不需要特定的激活剂，而需要金属离子激活，如除去金属离子就不能作用，必须的金属离子有Mn2+、Mg2+、Zn2+、Co2+、Fe2+等。酶的活性中心有丝氨酸，故又称丝氨酸蛋白酶。因此，这类蛋白酶遇到作用于丝氨酸的试剂二异丙基氟磷酸（DFP）便失活，这是碱性蛋白酶的一个重要特征。但是碱性蛋白酶对金属螯合剂EDTA、重金属和巯基试剂却不敏感。钙离子对此酶有一定的稳定作用。碱性蛋白酶有较大的耐热性，55下放置30min能保留大部分活力。碱性蛋白酶作用位点要求在水解点羧基侧具有芳香族或疏水性氨基酸（如酪氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸等），它比中性蛋白酶有更大的水解能力。此外，碱性蛋白酶还具有酯酶的活力。,酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的性质比较,Thanks!,