实训三 细菌染色法.ppt

2023/7/13,1,实训三细菌染色法,2023/7/13,2,1.细菌染色法,革兰染色法,复染色法,单染色法,负染色：,正染色,死菌,活菌：,抗酸染色法,芽孢染色法,姬姆萨染色法,荚膜染色法,用美蓝或TTC等作活菌染色,2023/7/13,3,常用染料,碱性染料：带正电荷，如美蓝、结 晶紫、碱性复红等 酸性染料：带负电荷，如伊红、酸 性复红或刚果红等酸性染料染色中性染料：又称复合染料，如伊红 美兰、伊红天青等,2.染色原理：小、色差染色法：简单、革兰染色,2023/7/13,4,3.染色方法（1）单染色法：菌种枯草芽孢杆菌（观察芽孢）（2）革兰染色法：菌种金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌（观察革兰染色性）,2023/7/13,5,涂片,干燥,固定,（1）单染色步骤：枯草芽孢杆菌,无菌操作两环菌液直径约1cm,晾干烘干等全干,过外焰3次目的,不烫染液不干,全干再看用油镜,2023/7/13,6,（2）经典染色法革兰染色法,由丹麦医生革兰于1884年创立。,2023/7/13,7,结晶紫 1min,革兰染色步骤:金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌,2023/7/13,8,革兰染色原理：壁结构、成分差异。（主）G菌壁厚、密,脂类少,乙醇不易渗入脱色G菌壁薄、疏,脂类多,乙醇易渗入脱色等电点不同。G菌的低，结合阳性染料多 G菌的高，结合阳性染料少细胞内核糖核酸镁盐含量不同。G菌的多，染料结合牢固，难脱色 G菌的少，易脱色,2023/7/13,9,革兰染色意义:鉴别；致病性；药物选择,2023/7/13,10,革兰染色影响因素：,菌 龄培养18-24小时的幼龄菌涂片厚度宜薄不宜厚各试剂作用时间脱色时间关键步骤，一般30秒 过长 假阴性 过短 假阳性,2023/7/13,11,4.实训结果:2片/人,单染色30分;革兰染色50分,评分标准：染色结果是否正确找到目标是否最佳目标目标是否清晰光线是否适宜,2023/7/13,12,5.思考题：1和26.实训总结：（实训结束后完成）分析实训过程的收获、存在的问题和解决的方法,