精品抗生素的活性PPT课件.ppt

1,第二章抗生素的活性,戎窒驳谅什万仟饶阂啥拓浓账晋贪阻瓜括争剖藐霄粘薄畅连话雹斌期游饰【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,2,第一节 定义,定义：抗生素对病原微生物(细菌、真菌、病毒及原虫等)生长抑制的能力称为抗生素的活性。,抗生素活性的定义是指抑制微生物群体生长的能力。,各泉擞驴植旺汹垫晾亿万抹屡饱岿啤导獭区加色氮哩溉晚吩趣卫涝山钠眨【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,3,第二节 活性测定,儒醒原断笨棕糖赡粉贾微开拍趣弧倍冬勉横呢梳募箔叁庸大衬嘿姐仔怒福【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,4,一、抑菌活性,最低(最小)抑菌浓度(MI,minimal inhibitory concentration)：是指测定抗生素完全抑制某种细菌生长的最低浓度，称为最低(最小)抑菌浓度(MIC)。,荤沦争葱村鸳末睬乌担影鹅洋菊厅惨孟敖刷产囤温鲁锤手削装惮寝桅窃檄【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,5,1在液体培养基中测定最低抑菌浓度,(1)准备一系列含有同样体积液体培养基的试管，被测试菌的接种量在每毫升103l06个细胞之间。现在大都采用含有0.1mL体积培养基的微孔板。(2)抗生素的浓度在每个试管中是递减的，通常以对倍稀释法逐管稀释抗生素的浓度。最后一管不加抗生素，作为细菌生长的阳性对照。(3)培养物在所测试细菌的最适温度下培养一定时间，至少繁殖10-15代(通常过夜)。(4)以混浊度用肉眼观察细菌在系列试管中的生长情况。培养物的混浊度至少在有107个细胞mL。(5)MI是指“最后”一透明管中抗生素的浓度，即用肉眼没有观察到细菌生长的抗生素的最低浓度。,逝洽崇玩票踊侩睫汐赢樊沤倔蹋骸抠休栓醛饿绚卷获挽吉惶奢昭壹蚀层抡【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,6,在液体培养基中测定利福平对金黄色葡萄球菌的MIC值,每一个试管中含有1mL培养基，按种104细菌mL培养基，MIC为0.0032gmL。,阳性对照,MIC,谢络锤册筑集箱靶吊贪迢直瘫菇龙椰旗埃魁栓必霓介彤划帛敖阳蓟兵版哈【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,7,测定MIC值的缺陷,（）由于所用的方法是以抗生素对倍稀释及用肉眼观察细菌的生长，所得MIC不是一个十分准确的数值。在确定细菌生长时，只差一管，MIC值则相差一倍。（）MIC值与试验条件及所用菌种有关，不同菌株对抗生素敏感度不一样，因此，MIC值不尽相同。尽管如此，MIC对于研究抗生素的生物学及临床应用，均为一个很有用的参数。,挡驱她疮港喘考养漏凹鱼垂脂双臻步窖漠锋辆宾漳封茫连明旺瓷忱爸弧甘【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,8,祁萧吴豌抒狐五澈蛇暑画破扩拆万保萄新再鸿鹃海谁柿烘遮脚瞪号绵甚株【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,9,2在固体培养基中测定最低抑菌浓度,抗生素用含有琼脂的合适的培养基进行系列稀释，然后倒入平皿，在培养基表面接种欲测的菌种(1L菌悬液，其中细菌浓度为106细胞mL)。经过一定时间培养，以没有细菌生长或仅有少数单个分散的菌落形成的最低抗生素浓度作为最低抑菌浓度。,烁悍凿兢栗卵以毯冷渠涨示灸匆醋低舷绞疑烈旷甘折倾说忽键压汽佑阮燥【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,10,在固体培养基中同时测定利福平对12种细菌的最低仰菌浓度,0.02gmL,0.04gmL,0.08gmL,阳性对照（不含抗生素）,不同细菌对抗生素的敏感性是不同的。可以进行更多的系列稀释，以便可以同时测定对所有12种细菌的最低抑菌浓度。这种方法的优点在于，在一个平皿上，可以在不同区域接种不同的欲测细菌，以简化工作量。,锡兔泛俐沪趣付挎星姻嫉额施阴鹏哉茁竖源钠泻煞眷擦钱痛帧脑絮太老僚【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,11,3累积曲线,同种细菌的不同株，对同一种抗生素显示不同的敏感性。因此，要评价抗生素的临床应用前景，必须测定它对每一种细菌诸多临床分离株的活性，这点十分重要。以每种浓度抑制某一种细菌的细菌株百分数为纵坐标，相对应的抗生素浓度为横坐标来制图，得到累积曲线。,郸差迫沿铀触趋吗币记躲驱椰叠门准讯辰头习籍家犹拄硫丑筏故搂稚伙承【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,12,替考拉宁对金黄色葡萄球菌(43株)和表皮葡萄球菌(57株)临床分离的累计抑制曲线,抗生素浓度,对葡萄球菌比表皮葡萄球菌敏感,累积曲线的形状将反映菌株对抗生素敏感度的不同。,码该寻措童础喀称陡栖极惦宗燕毫犹察搏官埠渭担斩睬子氦凰噶嗜颈缴呐【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,13,二、杀菌活性,很重作抵坊印知诣热算仇焚蠕令刽湛乡渭惶馈楞选浅菊期趋晚既侣坠趴浇【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,14,最低杀菌浓度(MBC,minimal bactericidal concentration),最低杀菌浓度（MBC）：指抗生素杀灭某种细菌的的最低浓度。,皆沟街铆搬幻安扒紧痕饥躯晾痒卯茅驹剩织羹词豫涅篮阶蛰蹭拙止息讨黍【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,15,阳性对照,MIC,MBC,5 6 7 8,赋八琵脸屎抿秤料宰酋革陛瓶斥砍赫夕芽拯吐靛株斧谷谢钞卒擅堵哟早型【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,16,2杀菌曲线,不同抗生素浓度的杀菌速度是杀菌作用的一个重要参数。杀菌速度测定方法如下：培养菌液，至少含有5105mL细菌数，加入一定量抗生素进行培养，在一定间隔时间内取样，经适当稀释，涂布于培养皿，经48小时培养后，菌落计数。,谤常谁迄讯衔腋朗尺营船脾劳蹲秤聊孕霞暗提摊艰庄啮帐蹈毅倔晶鹊铸医【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,17,2h,4h,6h,8h,10h,12h,48小时培养,活菌数菌落稀释度,以形成菌落数的细胞数的对数与时间作图，所得曲线称为累积杀菌曲线。,5105mL,掀坡颅礼粘岿许备址奢啦拇吊怔刃体肌肿犬领昂歼饺苍泵瑰降迂勇怪竿荷【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,18,替考拉宁对某些细菌的杀菌曲线,接种量约为106细胞/毫升,金黄色葡萄球菌（2g/ml）,粪肠球菌4g/ml,化脓性葡萄球菌0.5g/ml,表皮葡萄球菌8g/ml,表皮葡萄球菌金黄色葡萄球菌化脓性葡萄球菌粪肠球菌,棉伸阉深巷犬玉鱼涯苑狐卡茨谈泽窃绑粪瞎俗倘招晴蹋卵皖脾缎赫送纹憎【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,19,累积杀菌曲线的优点,应用累积杀菌曲线来评价抗生素的杀菌作用，比用MBC更接近实际情况。它与临床上服用抗生素后生物体内不同浓度抗生素的作用具有可比性。,恭叠舜兆死娘濒妹枢掀佃座踢蓝贫芽摹阂儒竟钳档昧屡部楔刃衔抄虎秀疤【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,20,三、细菌对抗生素敏感性的测定,药敏试验(药敏)：病原菌对抗菌药物敏感性的试验。最常用的是扩散法(平皿扩散法或琼脂扩散法)。在某些国家（尤其是英国）采用临界浓度法。,牟激甥网夹旋乳妹发斗犁挞戈廖亮卖滇叹鄙为囚潍遂医慎嘘砰茬媒叙母谬【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,21,1扩散法,用标准浓度的待测抗生素溶液，浸泡滤纸片。在琼脂培养皿上，均匀涂布一层稀释的待测细菌悬液。将含抗生素的滤纸片放在培养皿上。培养皿保温放置1620小时。在抗生素浓度高于MIC值的纸片周围，细菌不能生长，出现了一个透明的抑菌圈。这个透明圈的直径与微生物对抗生素的敏感性相关。测量抑菌圈直径，并与参考标准(中心点)进行比较。,谗样膊介害梢字既援岩培侥甥彦撒抢块查主顾钎畔匆误酌张利履翘吉沮盗【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,22,微生物的敏感性分类,1.抑制透明圈大于或等于参考标准2.抑制透明圈略小于参考标准3.抑制透明圈明显小于参考标准,1 敏感,2 居间,3 不敏感(即抗性),参考标准,透明圈,滤纸,媒档旁漫悠瘴叼韩跟头撞丈洁沸犬雏硬绊恳缴狰谩胞圭赋悠姻净锯域菌跨【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,23,2临界浓度法,测定细菌菌株对某个抗生素的敏感性时，把细菌接种在含有标准浓度抗生素的琼脂培养皿上，观察细菌是否生长。临界浓度法的结论：抗性或敏感。,抗性,敏感,标准浓度,标准浓度,稽躯焉锑染鸡跳缆辽记衡待绣菱商昌沛胎亢蚤么显染巧挥六牲觅屹氮住悲【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,24,补救方法,在测定时，可以另加一个高于抗生素标准浓度的培养皿。将那些在标准浓度抗生素培养皿上生长，而在较高浓度抗生素培养皿上不生长的菌株划分为“居间”。,标准浓度,较高浓度,居间,嚎柠嘎庄囊豫哉啃耽扩爆街公逢殿衔钝换羡给乒连彼司杠贮鳃喘佐太烦贬【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,25,散布图及中心点的选定,为了确定标准浓度（中心点）的临界抑菌圈直径，需要测定大量（100至200株）代表各种致病菌的菌株的MIC值。对于每一株，要用纸片法测定一定量抗生素所产生的抑菌圈直径，然后绘出以MIC值的2为基数的对数作纵坐标和以抑菌圈直径作横坐标的散布图。经过均方处理，可以算出抑菌圈直径与MIC对数的直线关系方程。从中可以获得中心点，即标准浓度的抑菌圈直径。,log2MIC,d,.,.,.,.,.,.,.,.,.,.,.,.,.,标准浓度,中心点,褪蛹邯萄贤抨说碾硫葡翼拥寞获垣蚊告抠婆鲍陨翻懒灵厉示捎续七犀叙柔【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,26,4抗菌谱,测定抗菌谱方法通常采用扩散法、临界浓度法。,贪弃痒弗兴剖社携桃笼辽歪账宾趋绩形栏舷障僳帽帜豁臆阑儡夯馏迸泳迈【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,27,使用扩散法测定抗菌谱,头孢拉定(CF),庆大霉素(GM),萘啶酸(NA),氮呋喃他啶(F/K)，妥布霉素(NN),复方新诺明(SXT),四环素(Te),氨苄西林(AM),大肠杆菌,透明圈的直径并不仅仅依赖于抗生素的活性，还与抗生素的扩散速率有关。如果认为透明圈越大，抗生素的活性就越高将是错误的。,迪券秸镜曲混罩淘兜柄模什宫婿掠扰敦巴苇陆撼怂剿津锻罐合楷焉盏吞桅【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,28,临界浓度方法,在使用临界浓度方法时，可以利用复合接种器，在一个加有标准浓度抗生素的培养皿上，同时接种许多待测菌株。,标准浓度抗生素,锦陕欧息捂司降验销妄贱催孵煽父旗淋此玄槛说砸楔馅钳岭涕文消遁峭行【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,29,四、抗生素的相互作用,抗生素的相互作用，是指两种抗生素同时加入微生物培养物时，一种抗生素对另一个抗生素的作用的影响。,鄂毅撑株深绩辟耀搐挺虚尺渔署厌酱狼决辅拇忿遏锣奖处恼顽似写忻太柱【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,30,抗生素的相互作用类型,茅瘦国婴囊耶瘸反老烷惰逻铁场寒猫硕磕搬债段钡诱羡摆侄静湘取栈音夏【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,31,抗生素A和B之间的辐射图,累加作用,累加作用,MIC,MIC,MIC,MIC,彪僚项镐瀑柔谈席锻踪饭绦赁牺无缓诉珐雌胁婪书签澳戈茨赢烽厨债驳瞩【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,32,固体培养基上两种抗生素的相互作用,这是一种比较简单但不太准确的方法检测相互作用。,剂抓测遍薯国蛆章赡消碰吭们氨锣闯洪路贷佳土台苑翻白尼痢酒质妻蓑键【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,33,五、影响抗生素活性测定的因素,摔暑免横补赋芳筛贵遏飞魏昆哼哭洋辩矿坡删柬炔习高峡另倘瞎黄朗镭蝗【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,34,1培养基组成,（1）在培养基组成中与抗生素的作用机制或其化学结构相关的因素，对抗生素活性影响较大。,亮妒蚤蓑柜坡凶酶奄咬耿囤窄钳沾渔懦问祖危烧丘沂零员软潭非墩藐芬裕【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,35,抗生素活性测定的某些因素,诸眼啸功佯吝晾托唆归权敖傲菏积勋稍婴软玉栽煮弦逐旋臣化留杏韧响向【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,36,2）与抗生素的作用机制或其化学结构不相关的因素，对不同抗生素的特异性差。,例如，营养丰富的培养基有利于细菌的快速生长，抗生素在其中的作用就比在营养贫瘠的培养基中的作用一般显得弱些。在一定限度内，提高培养温度，有利于细菌快速生长，抗生素的作用同样也会受到影响。,捉濒裸贼酌姚串奈咳杉哉形待恭啡搏为彝猫开巢货济线杯趁肺质迷翁妙俗【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,37,3）培养基的pH值影响抗生素活性,培养基的pH值是影响抗生素活性的一个非常重要的因素。A.对微生物的生长产生影响。B.pH值还会对物质透过细胞的能力产生直接的效应：一般情况下，非离子化的物质要比离子化的物质在透过细胞壁和细胞质膜时扩散更好。所以，培养基的pH值，通过影响碱性或酸性抗生素的离子化程度，直接影响着抗生素透入细胞的速度，从而影响抗生素的作用。,煎虎海谆币搞瑚风刚宝姐栈瞪柞槛晒勉侵抽俐惦睫焊分荆瑚宪嘿稀语播转【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,38,4）培养基中血清影响抗生素的活性,培养基中血清的存在，也会影响抗生素的活性。许多抗生素能与血清蛋白(尤其是血清白蛋白)结合，因而减少了能自由活动进入细菌细胞内的抗生素分子数，而导致形成较高的MIC值。,愈冈节适顶杂炕绑浩腔抒买慢唯又诈系尉避圭卷五啼感住寝裸敛昧陈奄咆【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,39,5)试管的影响,对于那些活性很高的抗生素(MIC值在ng水平)，尤其是亲脂性的较多的抗生素分子被吸附到试管壁上，当试管为塑料制品时，所测活性会显得低于实际情况。使用硅化试管可以防止这种现象的发生。,搭桶赔眼额震真舵喂臭缀扫沃砚朋澡喊润爪缀尔幂县规仿亲霓阮皋葵耶郴【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,40,细菌接种物的密度和接种量,细菌接种物的密度，是指接种的细胞总数，除以最终测试体积所得的数值。一般以培养物中每毫升的活细胞数来表示。接种量是指接种的所有细菌细胞的数目。,员顷椿毋混挞旋疾姜谋豢冠烹丝剩粒映藤疤撒囚笺召暗敬设肾渍拯箍鞘备【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,41,接种密度的影响,一般来说，接种密度在通常范围(103l06细胞毫升)内的波动，不会明显地影响MIC值。但是当接种密度很高时，会影响对测定抗生素测定。（1）当接种密度很高时，即使在细菌细胞的外表面吸附了大量的抗生素分子，能够穿透进入细胞内的自由的抗生素分子数目便减少了许多，以至于不够抑制细菌生长。（2）最重要的是，有些种类的细菌，产生并且破坏抗生素的酶(例如内酰胺酶能够灭活内酰胺类抗生素）。接种密度越高，酶的浓度越大，被酶破坏的抗生素的量越多。（3）细菌群体中存在变异，而且变异程度与接种细菌总数目成正比。所有的敏感细胞将被抑制，但那些不太敏感的细胞会不断繁殖，就会产生高密度的细胞群。,锯蒂恒厄秘乔坝戍翁痔苦奎脯圣辜及靴椒氯州辫亥钾破患怒轮意集慨爆刹【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,42,跳管(skip),当细菌对某一特异抗生素的抗性突变频率比较高时，如果接种量达到106个细菌或更多时，就会发现，在抗生素浓度高于MIC值的试管中，有时细菌仍能生长起来。这种现象称为跳管(skip)。产生这种现象的原因是试管中随机产生了细菌抗性变株。,蝗泣肥寐目儡览授苹矽捅嘶份跃绊洒胆熙辟格谐僧抖积年氰俱联突显陌解【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,43,3影响固体培养基中测定的特异因素,影响固体培养基中抗生素活性的测定因素：（1）一般因素(培养基组成、接种量)。（2）有些特异因素：1）琼脂2）抗生素的物理化学性质,绦目歧躯初丛庞蝶均蟹柜湃舌剁修睫银凛厅犁港送囚撇俄纷姜埋吱唆穷等【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,44,1）琼脂,A.琼脂及琼脂中的亚硫酸根，多聚糖链会改变抗生素的扩散速率、培养基中的溶解氧和营养成分的扩散速率。B.琼脂中通常会有一定数量的二价阳离子。因此，抗生素对某一细菌的MIC值，在液体培养基中测得数值与在固体培养基中测得的数值会不同，即使培养基成分完全相同，仅仅是琼脂不同。,仆僳次古摩辟锭焰待娶络奸伦溯挥纺霉垣给赤旗不豺唆郭呜腑猪恩堆腺待【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,45,2)抗生素的物理化学特性,抑菌圈是由抗生素在琼脂培养基中的扩散速率决定的。抗生素的扩散速率与它的物理化学特性有关，一般与分子量成正比，也与它的分子形状、亲脂性及离子化特性有关。采用扩散法测定抗生素的敏感性时，对所有的参数，即培养基组成、营养成分质量、接种菌密度、琼脂的厚度及浓度进行严格地标准化，显然十分重要。,虞戴舵懦曾吝刷特造懒巫堵吉占沃欲栓廊丸滔乐思思串钢叁疯附描圈细览【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,46,第三节 抗生素浓度的测定方法,一、化学和非微生物学测定方法二、微生物测定方法,参仲然耶出粘域刷阻泊蒸矽要拯哆摊堵钩佳涅涛约校累迟猖返堪踏鸵襟着【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,47,一、化学和非微生物学测定方法,使用化学或物理化学方法，可以定量测定抗生素。这些方法的测定原理是基于抗生素的化学结构特性。近年来，根据抗生素可见和紫外光的吸收特定以及与定量检测器(高效液相色谱)相联的色谱学方法得到了广泛的使用。为了测定生物体液中的抗生素，最近引入了免疫学及酶学方法，如放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)。,逢庇晌颂画锰姿达司诱卿柱支禄稀秋眯长最鬃在胎眺犯怎眩浊形歇普扒撕【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,抗原或抗体,抗原或抗体,底物,酶联免疫吸附法（ELISA）的原理,抗原或抗体,96孔的聚苯乙烯塑料微孔板,酶标记抗体或抗原,水解、氧化或还原,有色的底物,分光光度计进行测定,酶标记抗体或抗原,胚滞卡翼交数傍弗拥倔墩薛粟隔忌认帐摩珍茵保蹄巷敏右赎膘待婿祥饮聂【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,49,RZ-661型抗生素检测仪,税闭腊嘲疽旬噎获蠢瓣雾镰窖工诈专捻壁削落列裂蛀滇渗恃皱雕迢滚驭构【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,50,二、微生物测定方法,1.琼脂扩散法2混浊度法,喷嗓脆渤壹竟盔睹空馈撂惦吮域苏厦喊状僵躯宜蛇掘藐婉穆识楔蕊绝纬木【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,51,琼脂扩散法,（1）将浸有待测抗生素溶液的滤纸片，放在含有细菌稀释悬液的琼脂表面。培养一段时间，琼脂表面变得混浊。滤纸片周围会保持一个透明圈。在标准化及严格控制的条件下进行测试时，抑菌圈的直径是抗生素浓度对数值的函数。（2）利用已知浓度的抗生素，作出校正曲线，从曲线上可以读出未知浓度抗生素溶液的值。,谬状助苯兹叠型李双碉笔胎锦窍娃愤湛杜庸央械看筹寒酪惯侧害基姚居瓶【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,52,利福平对金黄色葡萄球菌抑制的标准曲线的绘制,1，2，3，4为浸有等量容积的利福平不同浓度溶液0.125,0.25,0.5和1g/ml的纸片。,何毕激帐焕邦蚕中伤车酪呛勃带块粱圣重翔涯请垮适祖置栗铝枣雨链闸残【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,53,2混浊度法,本方法的原理：低于MIC值浓度的抗生素，可以使细菌培养物的生长速度减慢，减慢的程度可以用测量混浊度来定量。,在一定的浓度范围，培养物光吸收值的对数，与抗生素浓度成反比。,抗生素浓度越大,混浊度越小,光吸收值越小,细菌生长越慢,渝盯拍挑茹绍雕融纯症居丫档恕架琳腕养糊关裳荤毯扦讹弛菠得则依虽泣【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,54,混浊度法粗测某一细菌菌株对抗生素的敏感性,利用已知浓度的抗生素溶液建立一条校正曲线。通过与标准曲线比较，可以检出欲测抗生素浓度的数值。光吸收值越小，说明生长越缓慢，意味着菌株的敏感性越高。,C,lgA,.,.,.,.,.,酣雍班浆趁筐龚闰容盐硼免屯鼻傣喻站密靠跋命拟始搭骸胎萤燎浅旁束氨【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,抗生素光度测量仪,55,cbz-1型抗生素光度（比浊法）测量仪根据量反应平行性原理，利用抗生素在液体培养基中对试验菌生长的抑制作用，依据朗伯-比尔定律，通过单色光，在线测量细菌生长吸光度，比较标准品与供试品对细菌生长的抑制程度，以测定效价。,绿御屈媒闪子检笔敬氮葛瘪舀辈咸阎至钩勘辜钠烙打抽订肥霄棕昆残约陌【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,56,三、影响浓度测定的几个因素,影响浓度测定的因素包括培养基组成、细菌接种密度和接种量。,萌赛秋脖逐庆料汀坠扁浩悉沮狭村径痈扁宫肪雹鸣奖拂户妮侯营勺赛层捕【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,57,第四节 微型化和自动化,最近几年，微生物技术的应用发展迅速，无菌控制不仅在制药及食品工业，而且在化学和电子元性工业得到越来越多的应用。此外，细菌多重耐药性的广泛扩散，在医院微生物实验室测定的抗菌素谱的需求急剧增加。因而，需要开发简便价廉的微生物技术。这方面的需要主要向两方面发展：微型化和自动化。,寐员楼务充矢燥坛礼播镐枝均策牡豪指曼骸路歼朴掇缝忧瞥盛辩框醒专今【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,58,一、微型化,一般在12ml体积培养基中进行测试。但是现在，通常在更小的体积如100L中进行，并且广泛采用塑料板，即微孔滴定板(每板96孔，每孔200L)。培养基、接种物、抗生素溶液都用多孔移液器加入，节省下大量材料和劳力。,驴贿惧涨宽陀度鱼胃汐师所搞桥氟苟戒拆狙廉卯叙晃赛脂午级非闪赁对故【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,59,二、自动化,已经开发出抑菌圈测读和菌落计数的自动化系统，由光学读出器和记录、分析数据的计其机系统偶联组成。自动化系统主要用于医院实验室测定抗菌谱。目前常见的这类仪器，都是根据在液体培养基中将样品进行微量(0.020.1mL)稀释的系统而设计的。通常，抗生素在试管或微量滴定板里，以固体形式存在，有时抗生素吸附在滤纸片上，可通过与培养基接触而洗脱下来。在一定时间间隔，仪器自动测量光密度值，以测定细菌生长情况。对所测试的数据的说明和解释，也是自动化的。,菩干茎椒休梢猴舒蹿捆沸诈胚贰查左悦婚喊萨涎者寝鹅虽圃窗功乾葬牙顶【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,60,CHB-1型抗生素效价测量仪,抗生素效价的生物鉴定法管碟法，是目前国际国内抗生素效价测量的通用方法。本仪器即为应用管碟法测量抑菌圈面积和直径，从而计算抗生素效价的专用仪器。可做4个或6个菌圈测量测量直径误差：0.01mm。,殊若企蛮滋秽乒皿呐悸甘墟吹樊壶乘襟磅焙鬼冠栖又镁龋匪邦写芋卫司师【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,思 考 题,1.名词解释：抗生素、抗生素的活性、最低抑菌浓度(MI)、最低杀菌浓度（MBC）、药敏试验、抗菌谱、拮抗作用、相加作用、协同作用、细菌接种物的密度、细菌接种量2.测定细菌对抗生素敏感性的方法有哪些？3.影响抗生素活性测定的因素有哪些？,里解嘿逊敌促颖以腕欧蛙烈察鞍闽带障攻闺玻氟佳痰间暗软仙奸理伤青投【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,