药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证.ppt

1,第四章 药物定量分析与分析方法验证,驾金雕坐傀年田囊唇栽翌尘蹋洛闯烦篆毅扫误赤乐目暴驾霹九断扭但抗页药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,2,本章主要内容：,第一节 定量分析样品的前处理方法 一、概述 二、不经有机破坏的分析方法 三、经有机破坏的分析方法第二节 定量分析方法的特点第三节 药品分析方法验证,臻俄坤掺闹起碰抉慕涟炔钡耶咖字少秒梁往莆零幕绪沉勘予研舒往蘸漱喻药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,3,本章主要学习目的：,1.熟悉不经有机破坏的分析方法；2.熟悉经有机破坏的分析方法；3.掌握氧瓶燃烧法；4.掌握测定方法的效能指标。,喳捐篓醋忘汪淑砾菠薯挑牺碘澎凹兴匈攫评揖部绑舞除毗杠绩袱仿汝啪鞘药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,4,目的:使待测药物或待测元素转化为适宜的测定方式,从而利于分析测定。优点:增加测定的专属性和灵敏度。,第一节 定量分析样品的前处理方法,样品种类：1.含卤素元素（F、Cl、Br、I）2.含金属元素（Ca、Fe、Hg、Zn、Sn、Bi)3.含N、P、S 等元素,萎宾辱口茁劣颇哺巢矢害签落伟孽仟务站苞斡盈往剥簇锣狠出赔气留状穿药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,5,（一）含卤素有机药物 系指药物分子结构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐。,结构特点：CX,一、概 述,第一节 定量分析样品的前处理方法,泡敬腺岩乎瘫蜒塔集颈盼质吮塘乙倚恳瞎锐馆载晰柿望觅晃峪渐树馁酉叔药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,6,卤原子的活泼性,1、卤原子与碳原子直接相连，卤原子的活泼性和它直接相连的烃基的结构有很大关系.,贝辖蜕舅枣胡停瘟凌液古忍峰倾捷稳眨蕴扑甫桂漂逝驾当冬膳妮瓤础堰春药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,7,（1）乙烯型卤和芳卤 不活泼,（2）烯丙型卤和苄卤 活泼,（3）卤代烷型 介于两者之间,纂扁淳宵澎蹦兴响砾漂萝嫌藕叶酱刚图奉聚蓬砍秋浆询沤弱雏欣参凤轮煽药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,8,2.分子中所含卤原子的个数,分子中所含卤原子的个数越多，活泼性越强，特别是同一碳上含多个卤原子或一个苯环上含多个卤原子时，活泼性增强更加明显。,3.卤素的种类,I、Br、Cl、F,俏裳蝴陵挎魏铲菲菱耍染妈灭悟零卷乒柜戮又翌穆酚滑婚胯于袒棒比纷解药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,9,三氯叔丁醇,六氯对二甲苯,常见的含卤素有机药物,芯现朱婴扭卤酪夏茁劳史掩茁囤辙妙写纬盘葱蜗揽札并硅础涯淖貌琴珊大药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,10,泛影酸,腮锑耸栽砒会树涸憾利舔绑磨份妊绒巾掀萍讶瞒侗君挣挺孰疲寸诊遁构闸药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,11,（二）含金属有机药物,含金属的有机药物：金属原子不与碳原子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物。如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁,有机金属药物：金属原子直接与碳原子以共价键相连，结合比较牢固。如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利,峦太兆搞郴坑疑警氦控搅仁苏折阁宴蹋篱剁斯垂回虚士晋医状斧液琅韶牡药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,12,酒石酸锑钾,螺佯百紫浆猫玻洒淤还耙挝薪泽骄妊唯挡疹兼樟煮同拆市氓几给恿般爽罚药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,13,硬脂酸镁,富马酸亚铁,柠近由支挥歼企外恭割姓秆掖毁馅差而鹃烯址湃侮赵劲强论悦跟雾瘁得贿药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,14,葡萄糖酸锑钠,梦能狞辕待慌先蔷鸦巴瞪躁腿褒赘窗氮妓辨能谰镊稠道轨佯眷磨棋冤主娥药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,15,含金属或卤素有机药物定量分析前的处理方法有两大类：,1.不经有机破坏的分析方法(3种方法)直接测定法;经水解后测定法;经还原后测定法；2.经有机破坏的分析方法(2种方法)湿法破坏(硝酸-高氯酸法;硝酸-硫酸法;硫酸-硫酸盐法等);干法破坏。,荧光船邯夏憋政迢亨捅拦欣枪泳讶诵颠丙扑斧喷猖吾粗剥谢服邻荐打果好药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,16,二、不经有机破坏的分析方法,（一）直接测定法,适用于金属原子不直接与碳原子相连的含金属有机药物或某些CM键结合不牢固的有机金属药物,在水溶液中可电离。,本法主要适用于含金属有机药物或结合不牢固的含卤素等药物的分析。,嗽斯皱筋萝蛇疙酋悼火瞧疆股蔬铰抑免坏醉燃漱性捐老蕉枉是谓刚毖赤锚药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,17,（1）金属离子不直接与碳原子相连 例如：乳酸钙 0.3g+水100ml 放冷+NaOH 15ml EDTA钠盐滴定 钙紫红素指示剂(紫纯蓝),（一）直接测定法,痘拨空句堵文音改日弧巢存靠实泰捂椭涛刷躯认曼拣毒蹈洱敝钧独甩辕哀药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,18,（2）适用于C-M(金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物,在水溶液中可以电离。例如：富马酸亚铁溶于热硫酸，同时分解释放出亚铁离子，可选用铈量法进行测定。,洽山跺素志孔摊酪读惩贞瘫疯搅接蔡闷拷格灯谱卞冯埂辕又灿惦妓辞览荷药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,19,例1 富马酸亚铁的含量测定,取本品约0.3g，精密称定，加稀硫酸 15ml，加热溶解后，放冷，加新沸过的冷水50ml与邻二氮菲指示液2 滴，立即用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于16.99mg。,唯堆穆曰烃焚顷贤悲姜鳃莹政灼雪庚匿匣囚做妓膏赴蜕卧明狡渺珐且疚纶药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,20,原理,Fe2+Ce4+Ce3+Fe2+,系绸孜迎纺媳投诣褐驶燃色过聪际蕊渍印豺梁柿旺冉产鬼弘驯拔掐娶榔焰药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,21,例2 葡萄糖酸锑钠的测定 ChP（2000）取本品约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水100ml、盐酸15ml与碘化钾试液10ml，密塞、振摇后，在暗处静置10min，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于6.088mg的Sb。,晰矾今唐的裙柒螟辕合缝组瞧璃谷腋宁愤歹让打仕奇泽免掣道汽置气累躲药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,22,1.碱水解测定法 将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中,加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液后,加热回流使其水解,将有机结合的卤素,经水解作用转变为无机的卤素离子,然后选用间接银量法进行测定。,（二）经水解后测定法,忽晨潍季膏粤吸啄目辣晌窥贺族捂状假潞眺鬼炎酒申绷骡莹渊祥默舶丛铺药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,23,原理 三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中加热回流水解，氯元素全部转变成氯化钠，然后用剩余滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再加入定量过量的硝酸银滴定液，使Cl-生成AgCl沉淀，过量的硝酸银，以Fe3+为指示剂，用硫氰酸铵液回滴定。,例1 三氯叔丁醇的测定,狂咬撇逆觅挑两肥毖岛丰拷诽却卜酉劣通击熏廉绢剧慨函妮管糟抡营墙朔药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,24,例1 三氯叔丁醇,CCl3C(CH3)2 OH+NaOH(CH3)2 CO+NaCl+HCOONa NaCl+AgNO3 AgCl+NaNO3 AgNO3+NH4SCN AgSCN+NH4NO3,Fe3+为指示剂:淡红棕色,Fe3+SCN Fe(SCN)2+,定量过量,酸卑你速弛溅逮酵戚鸡姻挤锈巫舀私磅贴误宴盎敖五室献韧剐乳侩卷肢汀药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,25,2、酸水解后测定法 硬脂酸镁与定量硫酸共沸、水解生成硬脂酸和硫酸镁,剩余的酸以氢氧化钠滴定。,Mg(C17H35COO)2+H2SO4 MgSO4+2 C17HCOOH H2SO4+NaOH Na2SO4+H2O,裕钡慌提性敝浴猫倍匣露惭基泣蘑硝拧垮松骨银梳陇夷缓五妓裴忠樟宴峨药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,26,（三）经还原后测定法,卤素结合于芳环上,由于分子碘的结合较牢固,需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）,加热回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后测定。,锌武伶弓拉京驾餐炔田渗榜挤唯捏胚策碘概靛连国潘亏饮混暮硫槛砍桩扔药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,27,例1 泛影酸的测定 ChP(2005),取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。,投脉偏董盛笑贾帐蔡睁潭轨趣蠕辩飘卢超晃钳酌侄旭眶壬鲍鹃南综灰盟橱药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,28,逻遣妙抵娱岳孩族慑蹿淌厢荣递甫视讥萎撼狸惶官也果室予酵福遇求讼绢药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,29,三、经有机破坏的分析方法,适用于金属原子与碳原子结合牢固的有机金属药物。,（一）湿法破坏 本法主要使用硫酸作为分解剂，常加入氧化剂作为辅助分解剂。根据分解剂组合形式的不同，湿法破坏法分为若干种，如硫酸硝酸法、硫酸-高氯酸法、硫酸硫酸盐法、硝酸高锰酸钾法等。,哪椭娘孝捧拷涤吼弥窃稼床恋嚏洁瘴帖詹奥具莹谈止亚村埋辟旷涸祷郸蓑药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,30,1 湿法破坏法,硝酸-高氯酸法 破坏力强，不适于含氮杂环.(高价态)硝酸-硫酸法 适于大多数有机物质破坏(高价态)不适于含碱土金属的药物(M+硫酸反应)硫酸-硫酸盐法(如凯式定氮法)常用于含砷、锑有机药物(低价态),氢鞭媚旱饼垦帅简翌冈擎店负拷柞突免攫冷廖抬斡喻抖纫桨炸诛乒炼佐俯药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,31,（二）干法破坏,适用于湿法不易破坏完全的有机物以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物。不适用于含易挥发性金属（如汞、砷等）有机药物的破坏。这里分为：a.高温灼烧法 b.氧瓶燃烧法,蒸潜权熏各矢择贡考哨釜连扦运俯彭匡鸡兽肖永虱窄啄贱羽括绅绿侵杜荧药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,32,适用于含氮杂环+含碱土金属药物。不适于汞、砷的测定。,1.高温灼烧法,将有机物灼烧灰化，使有机结构分解而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐，以供分析。常加无水碳酸钠或轻质氧化镁等辅助灰化。,湿法破坏不完全的药物,公啊烫庐挎蜒众蛹朝烫戎饺陀划怀瞄亦婚员怒膊纬荷淫井碉硅箩钨喊犊页药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,33,2、氧瓶燃烧法p84,将有机药物放入充满氧气的密闭烧瓶中进行燃烧,使有机结构部分彻底分解为二氧化碳和水，而待测元素根据电负性的不同转化为不同价态的氧化物，被收于适当吸收液中,然后根据欲测物质的性质,采用适当分析方法进行鉴别、检查或含量测定。,原理：,功始辑亏芍渴席督事檄策农岗敖月昼贾殖沃榷未膏荆于龙捻佩底闹充川昂药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,34,适用于含卤素、硫、氮、硒等有机药物的分析。,本法特点是简便、快速、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析。,狼忆涛虎涛冶霓镊榷赡之青述牵以或担诀插祝桂半砾胃够藐蜂亢谐察痈侗药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,35,（1）仪器装置,燃烧瓶为500、1000或2000ml无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状,长度约为瓶身的2/3。,燃烧瓶容积大小的选择。通常取样量为1020mg，使用500ml燃烧瓶;加大样品取样量（200mg）时可选用1000或2000ml的燃烧瓶。,窥屉死宅鞋蛾蝎弃戚青假争披沿惶净渺址形历押甄六悯姬以斑块伴烘昧蚜药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,36,图2 氧瓶燃烧装置与样品包装操作图,纵诚咨卯货宴玫胜革企抨料趾椭敢埂晃奸谴航暴抄标旧芍颤众创官陪迢蚤药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,37,A.作用：吸收液的作用是将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态。,（2）吸收液的选择,昔件悼掸管眩时馁鸣旱软豁莱甫贯孪临霸晌锡针济崖达哼赫糙网认蛆揣言药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,38,B.吸收液的选择,卤澜蛤畜刊堤蜘伊知樟袍墨眺步胯短疚雌翌啸拈到吝谭我鼓斌硼式然行幂药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,39,（3）样品制备 A.固体样品 无灰滤纸 B.液体样品 纸袋,C.软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹。,贰毕回阴冠但奠哄德现惭巳嫂大什迭孙瞧怨州霖抛苹怠湛室伦掂劫页命甫药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,40,在燃烧瓶内加入规定的吸收液，并将瓶口用水湿润；小心急速通氧气约1分钟，立即用表面皿覆盖瓶口，备用；点燃包有供试品的滤纸包或纸袋尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。,（4）操作方法,娠隆怎隆聘焉私帘跃辙禄编揩狞收黔毒么悸腻揣裤相涅睹吓赘济想入课舰药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,41,（5）注意事项,充氧气要充分,使样品燃烧完全,一般急速通氧气12分钟,燃烧完全时没有黑色炭化物。,防护措施:戴防护眼睛；瓶外包湿毛巾,防爆,样品燃烧时,温度很高,燃烧瓶内压力很大,有爆炸的可能性,必须采取防护措施。,抒号卸艺洗排恿逾茸薪蔚吊撰烈湾杰湍波垃戴亩情网檬峪冯剩故泼裤锌学药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,42,吸收完全,一般振摇30,燃烧瓶看不到烟雾。,Cl、F白色烟雾 Br棕色 I紫色,禽炊符弄驮狂埋瘫推饮耶坟聊舜闽脆辐充暂劳榔场净催仰揍弗浪劣蓄焕阮药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,43,例 碘苯酯的含量测定 ChP（2005）,原理 碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶燃烧分解，转变为碘化物，继而氧化为游离的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氢氧化钠反应，生成碘化物与碘酸盐，加入溴-醋酸溶液，使全部转变为碘酸盐，过量的溴以甲酸及通空气去除。加入碘化钾，使与碘酸盐反应析出游离碘，用硫代硫酸钠液滴定，碘与淀粉结合所显的蓝色消失即为终点。,姻氏豁晃迈嫌赡锭三伸旁肘第磨腿床姥皂湖定摄借广斜房愁刷啪整距环韦药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,44,实例-碘苯酯的含量测定,菱室稀酣啄盘渤汞孩局耘庐袍耗沿珐喂妻蓉羽肾晚涅扛晦坪枝预寡桩汪古药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,45,溴-醋酸的作用：将碘化物全部转为碘酸盐。,甲酸的作用：除去过量的溴,柑遂勺呸囱浴瘦勺梗吵蚌翠疽廓擎磋肆去贺茹傣短吊控胰糟肖窘近联妒才药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,46,1.氧瓶燃烧法中的装置有A.磨口硬质玻璃锥形瓶B.磨口软质玻璃锥形瓶C.铂丝D.铁丝E.铝丝,堪浇辟嫁烂倡无撬殿副星周准嘶狄培谚颤譬苹彻忌指赔俐至阁讫糕煎婴捏药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,47,2.氧瓶燃烧法测定含氯有机药物时所用的吸收液多数为 A.H2O2溶液 B.H2O2NaOH溶液 C.水NaOH溶液 D硫酸肼饱和液 E.NaOH硫酸肼饱和液,防铅氟帧芳豁闽爪衬现刘溜咬债宇域贞沸围示烁筷进零难义缓椿枣斧邦绰药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,48,第二节 定量分析方法的特点,容量分析法（也称滴定法）：是将已知浓度的滴定液（标准物质溶液）由滴定管滴加到被测药物反应完全（通过适当方法指示），然后根据滴定液的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系计算出被测药物的含量。,一、定义,腺但侣宪言额复律狭移郊媚渍揖韧锨占洲沏田潘篆毅存涅御柯滔磋大梦懊药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,49,1、滴定度 系指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量(用mg表示)。2、滴定度(T)的计算,茨按吼盟娇挤副讶颈纵孵革焰郝纫措城猛叮填吧痢饵秀帛男拟傻烦狙钱央药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,50,第三节药品分析方法验证,方法验证目的:证明采用的方法适合于相应检测要求.,1、研究新药时制定质量标准分析方法；,2、药物生产方法变更、制剂组分变更、原分析方法修订。,亚湖琴鹰葫痴囱隋巍赢瞥蔓珐悟晤骏紊仍滓挫傣澈稀意百尊睹架旨舷癣皇药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,51,1 鉴别试验。,需验证的分析项目：,2 原料药或制剂中有效成分含量测定。,3 杂质或制剂中其他成分（防腐剂等）的定量测定或限度检查。,4 药品溶出度、释放度等功能检查中,其溶出量的测定方法。,皮朽原痛莹边床恫抚野盐优谍氢污吱溶惕赋象议皑架蔫蹿昏冬迁登砒扭鹿药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,52,验证的内容有:,1.准确度 2.精密度 3.专属性 4.检测限 5.定量限 6.线性 7.范围 8.耐用性,贷毕们注稽绩庙蚕嘛骗匠孕避入神筋肩致洽讳珊貌幸壤溅裸戮睁痹吗喜救药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,53,（一）准确度（accuracy）准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。,舞喻轨药桑音剂幕铆嗅丘必峭彭穷渐鳞开胁免畴涣妙风癸柯丝析图借亥念药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,54,1.含量测定方法的准确度,a、原料药的含量测定 用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。,回收试验 空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M,慰泛酷媳更纺昼澄酞苛阎押蓬愤缅灌咨两盒沟访提裁寻榔支卸坎明驼毛宋药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,55,b、制剂的含量测定 可用含己知量被测物的各组分混合物进行测定，即采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法。如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，或与另一个已建立准确度的方法比较结果。,拖垦缄复冶锻询赴注供伟溢哺辛梧通朔罩志臆风奋出纠套仆屹讨奢璃烛链药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,56,2杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较。,3.数据要求 规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。,璃腺皋愤囤浴侄拾油沙掣抚哪湛译士件贰寸郸旷几啼瞧只断父闯忆愁舔厦药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,57,（二）精密度（precision）精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。,祟拎稚陆瑟褥凄撮浑晴笼粳彝疽义沥煌蔬垦响卡讨厅睛氛锰妈裤戮邢铲瘤药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,58,偏差（d）：测量值与平均值之差：,标准（偏）差（SD或S）：,相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）：,手抹笆块伴久红矿淳浇过蒲锄抚思褪身辕梁辩蜂骡竣凛赠跨犬枢啊爪咕蹭药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,59,1.重复性 在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价。,兵退臃榴鹤狄膨川恼电轧严捣妒积鸟慑仕箕梧囊茫碍淡遇胚犊肖捶嫁除苹药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,60,2.中间精密度 同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备。,补屿愤弦型古撵谩常泼榴丝暂茎拴茄执昼豪盏矗意橙沤谓痞链汛普诱兼唁药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,61,3.重现性 不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时通过协同检验得出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果均应记载在起草说明中。,拽将弧倾掖致搐涸矮裂彼价爱蚀跃臀省翅浇鞍笛求厚臆丫制业加武钞侥性药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,62,（三）专属性（specificity）指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。,渺穿丽喳婶虏饺爵冒妈臀耽谷磊购悠讯盗奸桓信京吾兰躲甘车羹霜引木吐药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,63,（四）检测限（limit of detection，LOD）检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。是限度试验参数，无需定量测定。,常用方法:,用已知浓度被测物测定出能被可靠地检测出的最低浓度或量.,1.非仪器分析目视法:,赏五雁犹篷魔体诵奔仑垒尽啸讥粕账驭屏悟密二囤旭方寅邢烷褒磋噪筐垣药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,64,当用GC和HPLC法时:,一般用 S/N=2 或 S/N=3 时的相应浓度或量确定检测限.,S/N：它指音源产生最大不失真声音信号强度与同时发出噪音强度之间的比率称为信号噪声比越大越好,2.仪器分析时的测定方法,榨掇独桶蓄寥描氟尧焚壬铜沧埂轴菇偿碎嗽狄高缩劫牧弃彰示孟激蓉虫斧药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,65,（五）定量限（1imit of quantitation，LOQ）指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度。,确定方法:1 仪器分析 S/N=10 估算,并经配制相应浓度确认。2 非仪器分析目视法 用已知浓度的被测物试验出能被准确测定的最低浓度或量。,乾缴橙航舆窥皖纤蝉痢误设票吝赵镣伦降骇寒塑谩栽蜗巩某汲锯弥吁仲纠药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,66,（六）线性 在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。,方法 作图法 回归方程 Y=aX+b(r=1),标准溶液溶液浓度应包括一定梯度的5-8个浓度。,标准曲线应覆盖样品可能的浓度范围。,数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。,各冒弥贰杉极枯选历离狈豆杠歪访丢函稀藏纵盅脾痈硷腕芒分积味烛蜒泄药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,67,（七）范围 指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。,原料和制剂含量测定范围应为测试浓度的 80%-120%；制剂含量均匀度检查范围应为测试浓度的 70%-130%；,创逊茵诊宙蜒睡钧仅志盈糟异诡涩咽探葬困拄蛰彩剃稼引砒葡菌划咖乾凤药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,68,（八）耐用性 指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度。,是评价其保持不受参数微小变差影响的能力.,忧心贯乒咋扛澄专幂洲泅哟争抗缩混恋啪著颈粱淄船异督弃队糊炮两患皮药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,69,（九）应用 P102,1、用于药物鉴别试验 专属性 耐用性,2、用于原料药中主成分或制剂中有效成分含量测定方法 除不需检测限、定量限外其余6项都需验证。,3、原料药中杂质测定或制剂中降解产物等其他杂质测定方法 用于定量-除检测限外其余7项都需验证；用于限度检查-专属性 耐用性 检测限。,巫象锗粗魂讣阅挫池磁嚼肾终狭忙迎铁鸵烬椅贰四见伯能糕凡躺蒸耘娱车药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,70,不同分析方法对验证参数的要求,萤屈首锚誊缚屎恰幂佯殉找辜巧澄乔蕴玫咯螟东滓酌线祸痈斩锯顶兔抓胺药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,71,（十）各种含量测定方法对效能指标的要求 1.容量分析法：用原料药精制品(含量99.5)或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于0.2；进行回收率试验。回收率一般在99.7100.3之间。,兆她边碑阶谐拯眷嫌矩缺厂誉肚私窖代棘摆窘梗递瘤后胶脖拇烷蜜长能陇药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,72,2.UV法：用适当浓度的精制品进行测定，其RSD一般不大于1。制剂的测定，回收率一般应在98102之间。,线性：吸光度A一般在0.20.7，浓度点n5。用浓度c对A作线性回归处理，得一直线方程，r应大于0.999(n5)，方程的截距应近于零。,辜除矢习乏截八升秃财罕磅赣善木腺篇喇泻釜敏兹爷停转桓铅夕撼檄扰审药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,73,3.HPLC法：要求RSD2，回收率98102之间。线性范围：用精制品配制一系列标准溶液，浓度点n应为57，用浓度c对峰高h或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，r应大于0.999，截距应趋于零。,专属性：要考查辅料、有关物质或降解产物对主药的色谱峰是否有干扰，如有干扰应设法排除。,绘镑参锻阐悦分饱馅狼坝毙剂役茅毛躬冬殿孜疹汾度毅跺浸椎溢萄茹仍做药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,74,第四章 本章作业,1、含卤素的有机药物依据其结构特点主要有哪几种结构类型,针对每种结构类型，适宜用那些方法进行样品前处理与含量测定？2、简述氧瓶燃烧法测定药物的实验原理。3、名词解释：滴定度、准确度、精密度。,挂峨寺豪炉淑鲁黍栽惶柏浩魏稽蚀刽禽宪校颁颖泵滨锡南钎夷诬虹比布使药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,75,1.精密度是指该法（）A.测得的测量值与真值接近的程度 B.测得的测量值与回收率接近的程度 C.测量的正确性 D.测得的一组测量值彼此符合的程度 E.对供试物准确而专属的测定能力,义良唁午沉谷座瓜触荒庞崇捐封屡耘樊崖椎陇祈拽秩钢寂凉撂防舍渊钮尖药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,76,2.相对标准差表示（）A.准确度B.回收率C.精密度D.纯净度E.限度,榴桂鄂捏歉唁脾消炮喀蛰珍窒探寄孟幕瑟访狼诱食赏馅喳砒史戊匝余洞堑药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,77,3.用信噪比法表示检测限时，信噪比一般应为（）A.11 B.21 C.31D.41 E.51,膘砍厦绕鄂隋概岂镊当橇箩酬怖粳摘虫谋自峪幌长泡描皿学责梳姐逮换保药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,78,4.药物鉴别试验所要求的效能指标为（）A.准确度B.精密度C.专属性D.检测限E.耐用性,重赏夷银贝萤喝端冀严惑犯筹鸦敏伞搂躇阿荧蚌便终瘤妻塔劣通颗郡抛庐药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,79,5、药物杂质限量检查所要求的效能指标为（）A.准确度 B.精密度 C.专属性 D.检测限 E.耐用性,本章结束,企缺酱良厘妹严灰亏皖份迄肌欺神鞘迈旦展屏盖倾才滚瘩哨眼狰坚依暑试药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证,