反胶束萃取及其应用.ppt
Reverse Micellar Extraction反胶束萃取及其应用,理研1307 景楠 2013201075,图藏绿肮谍值亭栅铸搏运罐勉嘻饿挞秆杰毗子坡劳昭愿框晾键碳踩崇胎撤反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,产生背景,传统萃取方法（如溶剂萃取）难应用于蛋白质的分离，原因：1.大多数蛋白质都不溶于有机溶剂，与有机溶剂接触，也会引起蛋白质的变性 2.萃取剂问题，蛋白质分子表面带有许多电荷，普通的离子缔合型萃取剂很难起作用反胶束萃取,葫椎叹柠淄胖辫厅闲羌屡谈悉仟佣已喊羹尼脓疚届蜡杭态执蚂象规吝推查反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束,正常胶束：表面活性剂溶于水中,当浓度超过临界胶束浓度(CMC)时,就会聚集在一起而形成正常胶束，亲水基向外、疏水基向内。反胶束:当油相中表面活性剂的浓度超过临界胶束浓度(CMC)时,其分子在非极性溶剂中自发形成的亲水基向内、疏水基向外的具有极性内核的多分子聚集体。,桑俭棋芦中正蝉演霞块恨蔡坷侮后禁乐杜衙妄曙国异锌躁沂敖谬醉玫粥舀反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束的制备,注入法：将含蛋白质的水溶液直接注入到含表面活性剂的非极性有机溶剂中，然后进行搅拌直至形成透明溶液为止（过程较快、可控制平均直径和含水量）。相转移法：将含蛋白质的水相和含表面活性剂的有机相接触，在缓慢搅拌下，一部分蛋白质转移至有机相中。（过程较慢，处于稳定的热力学平衡状态和获得较高的蛋白质浓度）。溶解法：对非水溶性的蛋白质可用此法。将含有反胶束的有机溶液与蛋白质固体粉末一起搅拌时蛋白质进入反胶束中（需较长的时间）。,饵莆退腥徘瓷廓秦纳油蚌知潮例乙褒庄萧估撬炙淤乏求忽艘吓补疤勒鳖牛反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束萃取体系,单一反胶束体系：阴离子型：AOT(丁二酸-2-乙基已基酯磺酸钠)/异 辛烷 阳离子型：十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、二辛基 二甲基氯化铵等季铵盐 非离子型：能使反胶团变大,从而可萃取相对分子质 量更大的蛋白质混合反胶束体系：两种或两种以上表面活性剂构成的体系，蛋白质的分离效率更高,楷路笺颈焉闹奥寓纫帖严坟匆诣栅喇域辅抢普埔嗣有灌婆中簇孵镇店奄轨反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶团溶解蛋白质模型,1.水壳模型（普遍接受）2.蛋白质疏水部分直接与有机相接触3.蛋白质吸附在反胶团内壁4.蛋白质的疏水区与几个反胶团的表面活性剂疏水尾发生相互作用，被几个小反胶团所“溶解”,懊十碉拦职澜许藤怀赣出本示靛鸽帖呼狙雪佩肘霹肤倡队棉裤酞铰蔑酸脖反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶团溶解蛋白质机理,反胶团的极性内核在溶解了水后,在内核中形成“微水池”,可以进一步溶解蛋白质等生物活性物质。屏蔽作用使蛋白质不与有机溶剂直接接触,而水池的微环境又保护了其活性,从而达到了溶解和分离目的,滤宾鲁尾饰婆京店福七沪浦豆吠肉被擅面冶庶谓昨悼头光冗磁优油筒盎泣反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶团溶解蛋白质过程,蛋白质进入反胶束溶液是一种协同过程,改变水相条件（pH、离子种类和强度）使蛋白质由有机相返回水相，实现反萃取过程.,蛋白质 表面活性剂,静电作用,变形,含有蛋白质的反胶束,扩散进入有机相,蛋白质萃取,粱巍扰栅举育侈鲤霹锅衬斗茅遗镣治廷埋棋娠沃谎敏级濒失陛缨笛难庞弱反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束萃取的影响因素,汕骇分豁记堆齿拓羡皆恤俩雌庭脯坏峙莹煞蓖瑞诬妹滋西枉弗崇职针逊炔反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束萃取的优点,成本低，溶剂可反复使用萃取率和反萃取率高解决蛋白质变性、降解的问题.从完整细胞中提取蛋白质和酶具有工业开发前景的蛋白质分离技术,殆裴芜钟球拯错如婪换磕镑辑赐桓擅棺庞薪瞳殖嚼传莎瞥抠志襄攒寇盼箍反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束萃取的应用实例,混合反胶团萃取-淀粉酶,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和脱水山梨醇单硬脂酸酯聚氧乙烯醚(Tween-60)为混合表面活性剂溶于正丁醇-异辛烷中构成反胶团系统，萃取纯化-淀粉酶,食品科学 2011,32(21):214-217,棺陀户摘陌汲编谐您垣窑亏响瘸冤莆郑匆京酉杭踌渍朔胁地黔鲁讽臀骆啡反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束萃取的应用实例,混合反胶团萃取-淀粉酶,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和脱水山梨醇单硬脂酸酯聚氧乙烯醚(Tween-60)为混合表面活性剂溶于正丁醇-异辛烷中构成反胶团系统，萃取纯化-淀粉酶,食品科学 2011,32(21):214-217,蕊耿苹亚橙阎召粘疵炬贮灶砌秸狡币催钒踞视句寞货鹤釉咯臼萝涨罗展册反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束萃取的应用实例,反萃取技术对脂肪酶的高效纯化Efcient lipase purication using reverse micellar extraction目标函数：纯化度，回收率变量：表面活性剂的类型和浓度，pH，离子强度，有机相/水相比例,原始脂肪酶培养基pH对回收率和纯化度的影响,盐浓度对回收率和纯化度的影响,Bioresource Technology,2012,108:224230,烤潞黎讶祟扛络胚疏遂苞多刚郭耿醛深宵笼番帖坑泊恫与装呛噬蛾拆捧粪反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束萃取的应用实例,反萃取技术对脂肪酶的高效纯化Efcient lipase purication using reverse micellar extraction目标函数：纯化度，回收率变量：表面活性剂的类型和浓度，pH，离子强度，有机相/水相比例,加入15%异丙醇后，不同浓度NaCl对回收率和纯化度的影响,反萃取过程中，pH对回收率和纯化度的影响,Bioresource Technology,2012,108:224230,辜禽种灌窃偿期娶骏彩叭哪盗修岳庆香奸扔妇瓶扦粉矣顶挛焰熟系蜜沃胃反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,反胶束萃取的应用实例,反萃取技术对脂肪酶的高效纯化Efcient lipase purication using reverse micellar extraction目标函数：纯化度，回收率变量：表面活性剂的类型和浓度，pH，离子强度，有机相/水相比例,V水相/V有机相对回收率和纯化度的影响,结论：1.反胶束萃取技术可以实现2.脂肪酶的高效纯化及回收3.纯化倍数：15倍回收率：80%,Bioresource Technology,2012,108:224230,旨吼捡礼宴逾淹敢潞捏耀证毖酌必掐评臭荆菇少扫饮纸胞段搀筐级嘘遥蟹反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,参考文献,1刘俊果,邢建民,畅天狮,刘会洲.反胶团萃取分离纯化纳豆激酶J.科学通报，2006,51(2):133-137.2高树刚,宋伟明,安红.混合反胶团萃取-淀粉酶J.食品科学,2011,32(21):214-217.3 Wang W,Weber M E,Vera J H.Reverse Micellar Extraction of Amino Acids Using Dioctyldimethylammonium ChlorideJ.Ind.Eng.Chem.Res.1995,34:599-606.4 Gaikaiwari R P,Wagha S A,Kulkarni B D.Efficient lipase purification using reverse micellar extractionJ.Bioresource Technology,2012,108:224230.,肤迪烤妒背购卖法培鲸哩蔗址骗杆鳞掀狱盐糟箱买色臼卞共舒蝎质虐亭缸反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,污莽壮功无讳搔别椰诚父芝请芭甄骤皿矗冉嘛貌馈漏悯酷价斟拘适贸佛储反胶束萃取及其应用反胶束萃取及其应用,
