动物细胞融合和单克隆抗体.ppt

2.2动物细胞工程,动物细胞工程常用的技术手段有：,动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体,2.2.2（1）动物细胞融合,动物细胞融合,荧光标记的鼠细胞和人细胞融合示意图,植物体细胞杂交,动物细胞融合,动物融合的过程请同学们阅读课本P52动物融合,用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程,不同DNA的两个细胞,灭活病毒诱导细胞融合,融合后的细胞进行有丝分裂,1、动物细胞融合过程,1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？,酶解法，如纤维素酶或果胶酶,2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？,无需，因为动物细胞无细胞壁,3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？,离心、电激等物理方法；PEG等化学方法,问题讨论,动物细胞融合,4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？,能 还可以利用灭活的病毒进行诱导,5、植物体细胞杂交过程应先进行原生质体融合再进行组织培养形成完整的个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？,不能,问题讨论,动物细胞融合,问题讨论,动物细胞融合,7、你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？,6、为什么要用灭活的病毒？,病毒一般对生物体是有伤害的。,仙台病毒,紫外线,丧失感染活性,保留融合活性,动物细胞融合的概念,动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程,动物细胞融合,融合后形成的单核细胞称为杂交细胞,有何同？不同？,动物细胞融合,动物细胞融合,获得杂种植株,细胞膜的流动性,植物、动物细胞融合的比较,动物细胞融合,8、你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？,利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞,9、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？,生产单克隆抗体,动物细胞融合,问题讨论,2.2.2（2）单克隆抗体,单克隆抗体,什么是单克隆抗体,单：克隆：抗体：,单个细胞？,无性繁殖,抗原 抗体,特异性结合,抗体是由何种细胞产生的？2.抗体是如何产生的？,单克隆抗体,抗体不纯,筛选单一浆细胞,不能增殖产生大量抗体,产量少、纯度低、特异性差,单克隆抗体,3、传统制备抗体的缺点是？,3、传统制备抗体的方法是？,如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？,单克隆抗体,问题讨论,提示：,1.什么样的细胞可以产生抗体？2.什么样的细胞可以无限增殖？,瘤细胞和癌细胞有何区别？,共同点：两者都有无限增殖的能力不同点：瘤细胞不能转移,设计方案：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,杂种细胞,单克隆抗体,单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,（选择性培养基）,选择性培养基：使亲本细胞不能存活而杂种细胞可存活,单克隆抗体,诱导其融合的方法有哪些？,单克隆抗体制备过程,单克隆抗体,B BB B瘤 瘤瘤 瘤,细胞融合后培养液中有几种细胞？,单克隆抗体,思考：,（选择性培养基）,单克隆抗体,思考：,1.小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？2.制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？,细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活,细胞融合技术、细胞培养技术,单克隆抗体,在基础理论研究中具有重要意义 在疾病诊断、治疗和预防方面，具有特异性高、灵敏度高等优越性。生物导弹,（作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤）,单克隆抗体的应用,小结,两个过程,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势,单克隆抗体,下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,原代,传代,1.动物细胞工程技术的基础是：（）A动物细胞融合B胚胎移植C动物细胞培养D核移植,在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同,.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞A BC D,C,