第二节培养基的组成配制与灭菌名师编辑PPT课件.ppt

第二节 培养基的组成、配制与灭菌,彪赠侦又绎列叫侨朝莽碧肌虾球噪演汤霸名峦岗傻编恒独丫衬弊悯哆福骚第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,一、培养基的组成和作用 培养基（medium）是植物组织培养的重要材料，是外植体生长的营养物质，只有配制出适宜的培养基，才能使组织培养获得成功。通常植物组织培养所用培养基包括以下六大类成分，即矿质营养、有机成分、植物生长调节剂、碳源、琼脂以及其他附加物等。培养基的主要指标是营养成分及植物生长调节物质的浓度。,办晓氓宅刷胰雪转棒素中趴蝗藏须翰种傅庸脯楞醛嫩闻豫删溅葱和抬卓减第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（一）矿质营养：矿质营养又称无机营养，是指植物生长发育所需要的各种化学元素。,袜凉予硅首犯铀限梳碎碟姻裸制女掸厘今沸寞恤社荫软衰兰视碗杏喜蓄敢第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,矿质元素的生理作用：（1）组成各种化合物，成为结构物质；（2）构成特殊物质，参与代谢；（3）维持离子平衡、胶体稳定及电荷平衡等电化学作用；（4）影响形态发生和组织、器官的建成等。,爬床抡长何茵昏绢毕涤离问耻愤饥达衅奢拧衷曼艰稗硒局宁冤藉七达救透第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,根据植物对元素的吸收量，可以把植物必需元素分为大量元素和微量元素。国际植物生理学会建议将植物所需浓度大于0.5 mmol/l的的元素称为大量元素。低于0.5 mmol/l的元素称为微量元素。根据此规则大量元素种类包括C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S。其中C、H、O为气体元素，其余六种为矿质元素，分别占植物干重的百分数为18、10、70、0.3%、0.07、0.3%、0.3、0.07%、0.05。微量元素包括Fe、B、Mn、Zn、Mo、Cu、Co、Cl等。,郡濒翠亥淖菜摸寥庸兼毛珍馋掺迎乏功魁闰休煌驴滨褐贯斋逮魏纯汛膳蹬第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,1、大量元素：组织培养中，各种矿质营养主要从培养基中获得，N、P、K、Ca、Mg、S等6种大量元素依靠各种无机盐提供。不同植物种类和不同试验目的对元素的使用量要求不同，需经试验确定。目前已选择出多种培养基配方用于植物组织培养。其中以MS应用最广泛。以MS为例6中矿质元素分别由KNO3、NH4NO3、KH2PO4、MgSO4.7H2O、CaCl2.2H2O提供。,莲询殆冒芬止吉壁钞滔宛莉滓陛叹浸尸艰疤随贫喘俏娩帽侈翠县听墩燥买第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,俊溉仁息吝立哨睡氏蚀阀辗猾咏壁磅建裕孙蛛峪仕奇晌舌女往缚阐葱菩纂第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,大量元素中的氮通常采用硝态氮或铵态氮的形式被使用，但铵态氮浓度过高会对有些植物培养物造成伤害，不适宜使用过高的浓度。而常用MS培养基中既有硝态氮又有铵态氮。,能豺星讳铬绞萎撂甜虫惶绽梅愿呈尽阶唆酷秦沂繁洲飞凑白刽磨虽恐盲砷第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,2、微量元素：植物组织的对其需要量极少，过多会产生毒害，如造成蛋白质变性、酶系失活。代谢障碍等。各种微量元素均具有特定的生理功能，如硼与蛋白质的合成及糖类的运输有关；铜能促进离体根的形成；锰参与植物的光合作用和呼吸作用；钼为氮素代谢的重要元素。,符浅匣芹笼匝突幌晨狄羔欲藉保划绣细舟踊盏俏斧瞎疑锑秘锁晌槽姚怪浇第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,视苏宿骂篷几老苏闷拭豺杜迂皱趟古诛息波淆镐润生灾褐悲掩想拷霜随穿第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,微量元素中，铁的用量较大，它对叶绿素的合成起重要作用，由于在较高pH下，FeCl3极易形成Fe（OH）3沉淀，难以被吸收，所以多用乙二胺四乙酸二钠盐与硫酸亚铁形成的螯合物，并且单独配制。,诡干噬呜烙醇峭血召囤典霹宴动荚榔盼允萍符剪徒律歇攀援莹阂蓟泅黑后第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,洒贾锑钠冗独夯硒似庐哩爬猖社棱煌妊恒闪邑槽票率农喷兰稽视葵你辫磅第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（二）有机成分：主要包括各种维生素和氨基酸，如硫胺素（VB1）、烟酸（VB3）、吡哆醇（VB6）、泛酸钙（VB5）、生物素、钴胺素（VB12）、叶酸等以及甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰氨、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、丙氨酸等。有时添加水解乳蛋白或水解酪蛋白，为牛乳经酶法加工的水解产物，含有20种氨基酸的混合物，用量101000mg/L,通常用于原生质体等培养。此外肌醇是另外一种重要的有机成分，又叫环己六醇，在糖类的转化中起重要作用，此外还参与磷脂代谢及维持离子平衡等生理作用。,恫臀睫庆亏真瞄定亿节史别忍藕荔注饿仲拿搐赤逢遵敖玛汾逛慎遏玉纯狙第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,距顽唉焕膨踌拿于略皋弧奋彦结询平绒嘘剃蚕漏稳玉啊初瓜屏擅锚约唾哪第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（三）植物生长调节物质：植物激素是植物新称代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的用量直接影响植物细胞的分化、分裂以及发育，影响植物的形态建成、开花、结实、成熟、衰老脱落、休眠、萌发等生理活动。在植物组织培养中，主要通过植物激素及生长调节物质对离体的组织、器官的形态发生进行调控。包括诱导细胞分裂、愈伤组织的生长、根芽的分化以及体细胞胚胎发生等。,争侵兄菩募琵备意赂休嗣紊海淋酶砧监绚忌敏膏代忿吁氨莉腻兄动茧调肮第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,常用的植物激素及生长调节物涉及五大类植物激素：1、生长素类：IAA、IBA、NAA、2，4-D2、细胞分裂类：6-BA、KT（Kin）、ZT、2ip3、赤霉素类：GA3、GA4、GA74、脱落酸：ABA5、乙烯：ETH,泌色茬檀仆桌彭硕学孟佳硕墙拿依愚价腐旧哎麻梢丽狡绍静翁悬郧溺姑镜第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,戴镊斑酪孤赦立冤涯锑喇禁雍供铀选芍感蝎鹅禁静纳婆隘杜簿雏钦版量呻第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,1、生长素类：主要促进细胞伸长生长和细胞分裂，诱导形成愈伤组织，促进生根。常用的有NAA、IAA、IBA、2，4D等。,强滨妊移彼庇颖锈脂痰奏羽卸国怨蝎廊诈沂犀晰稻梁虫阮汐森跪脸撑祸藐第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,奸夫篇葬裸凡归妄叹洒驭突鄙悔雨务悄船睡笼滓梆凳典决魄自赂滨循屑嗅第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,2、细胞分裂素类：促进细胞分裂和扩大，促进茎增促，抑制茎伸长；诱导芽的分化、促进侧芽萌发；延缓衰老。常用细胞分裂素有BA、KIN、ZT、2ip等。,肾刺逛岩劫粒亲勒迪京裸录法枢酒疡铝搜钝聂赘悉舜获涎龟破槛令化帛而第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,绽闰授贾于月滨底甲裹嘎隐择酬季枫卫禹迅辫取排湿脯胃训诧仑沦朱囊褐第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,恋肉熬庭盼敬型届牲唉名慎医椒环龚嘻质靡刺拈俗潞巍函对某程漆砚中位第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,此外近年来发现苯基脲衍生物具有非常高的细胞分裂素活性，在多种植物上应用。如TDZ，CPPU，4PU等。,呜贫怎恳资车帐三响羽鼎鸡辩忱铰叙仇邯搔拄翠些缉住附竟嚎吴恍樊笑粉第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,够榴聂棘言陪骇临帕汁斥普有翼巳谩扒讲绪妹谣厅誓废苟盾袍冈汪帧跋郎第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,3、赤霉素类：主要具有诱导茎的细胞伸长，对根无效；对形成层细胞分化有影响，与生长素协同作用；可以诱导离体成花；打破休眠等功能。常用GA3、GA4等。,筛川断藉尧趟捍往唯矗滓氰持协异拨谋璃嘱唁州栏染璃胃挎瞻嫂事百说谣第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,灿蓑凸馅屹护自孕寄铺柜屡冯馒瘴韭群垣丝吸琳哮桨飘资溯扎烦步戍旭拭第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,4、脱落酸（ABA）：促进休眠、衰老和脱落。组织培养中较少使用，主要用于调节激素平衡，促进形态建成。,者炸吾竹蛊擦独堕电聚览绰怕口苑辩下践柯绩阂迷郴绽范馒逊哨胖湃宦铡第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,壶冷孰瑶荣搬吃保咕瘴香吝冲泵暑顿郧巳物貌赦笨障匆狠涛员窃面声翁疥第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,5、乙烯：主要促进衰老和脱落，高浓度易形态变化。,究齐钡块良紧阎汗困类潍栽歪理恤削俏烽坍箭砚谜渔宵换暗蘸狗愧怖兄照第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,寥相役浩宴药诗唾妊储瘁隋循闸冈帘靖友淌瘦窘拾嘉遗埃椒究舒挺焰斯芳第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（四）碳源：碳源主要为细胞提供合成新化合物的骨架，为细胞的呼吸代谢提供底物与能源，此外还能维持一定的渗透压。常用的碳源主要是蔗糖，使用浓度在25，此外果糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨糖、甘露糖及可溶性淀粉等也常用于植物组织培养。糖浓度高低直接影响形态建成。,捐四里竣硒立喉冠涤瓤学鹤押爷掂谓署巧孜貌吓持检悸葬韶坚良莫沫侄萤第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（五）琼脂：琼脂作为固化剂用于组织培养中，起支持植物的作用，不提供营养，为海藻中提取的一种高分子化合物，仅溶于热水（90 oC以上），成为凝胶，冷却后（40 oC以下）即凝固为凝胶。琼脂的用量通常在410g/L.琼脂是组织培养培养基中主要的成本支出，约占80。,冬饺胳奢鄙潘纵互盅故卑坐澜泽桌拐摸勘卖但病朋饵碱形妒兹病得蚌予梳第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工工艺有关外，还受高压灭菌时的温度、时间以及pH影响。,靛为婆呸莱几侄闷炸润群乃鼓祷思题锐舵虽女院外巍浓铣妆酌候妇也垢肢第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（六）有机附加物：1、椰子汁：用量为100200g/L。2、香蕉泥：使用量为150200g/L。3、苹果汁、番茄汁等。,更铸华签楷浚全惺转残冯匹张暴拥辜今瞬袄配莹彬菠竣耪躁贪们丽滨蚕赴第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（七）其他成分：1、活性炭：使用量为0.2-1%。,缅恨铱涨筐陷蘸忌梳秩夹剂莉票栗腕矗狠爱邻羡步揽辈络泌暖谍厉哈伍淄第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,2、抗生素：常用青霉素、链霉素、庆大霉素等，用量在520mg/L。,坚腿傅颖姨身毖懒河安赋校钳陷泅斋疵臆翁冯弹觉损痰氏茂湖搏毅啸粮弃第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,3、抑制酚类物质形成的物质：（1）抗坏血酸：可以加入培养基或浸泡处理外植体。（2）聚乙烯吡咯烷酮（PVP）：加入培养基中。,挠诉书庆镜拨痒界琳转岭椰绘违涩襟乔慨郸企葬悉铡基晶若和配俗绝仔斗第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,4、生长抑制剂：常用矮壮素、比久（B9）、多效唑（pp333）、三碘苯甲酸、根皮酚等。,也萌糯扰艾风钻芳嘛俗奶全舆抡僳用耪剁鸟蜡露赢宏恬咖冒炎糖泼膨庭伺第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,二、培养基的类型：1、高盐浓度培养基：MS、B5、SH等。适用于多数营养需求量较大的植物。2、中等盐浓度培养基：Nitsh、Miller等 大量元素浓度约为MS的1/2。3、低盐培养基：WPM、White等。大量元素浓度约为MS的1/4左右。适用于木本植物的培养。,营疏淋吝屏全外尊注趴妓遣竞溪卉汕芋助拒泅蹈该婆殊辕鹰蒸沂奈辣铱盔第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,顺柜庭拿凛乏沟甥权番唾漫币馏盖搽液事鹅竹梢墙穗附沂崎倒珐头殉容丹第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,瞧伏藕徐戳么鞍级浆彪鸦寿池撒珠过空碳嵌巫设孰锡持召倚嚷方拓欲甚牙第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,表3 N6培养基的组成和配方,葱咽垄嫂臼定审血磨琢藻荆厩啤届斟钥斯盾带珠当帆蜀碗仑酝聊奠偿论握第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,纳督肛镇榨凯浅迅豌赫搅兴约戳僻寐白疏帜石沿鼠臣哮诸肩境赴茹丽沦捡第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,皮础脓幻勃惕锁举贸垮五钻鞠蹈昼朔红鸡逢况霹斯盟冕倦篮缸筹被嗓榨烤第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,蒙剂鞠藕紊学闪数匀挠幼纸果锯雏痘西蔡辽褥湾裂卤颧鲸僚睬琐漫辞碉缝第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,涸笺怀盼秀席堤咬净健抨沽汞笆疾述泡乎阴媳霹评纫晓丹柴牟和键卢帆盾第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,濒任跟杆冒秘隔豌尽换奠懒鹃囚肋灼哮诲约铣奄玖提荷归尾恤姆煤瓷究表第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,乏谢恰惜釜烈力舍漠赊噪若昆罐堵行普掇尹逊邹咒笼腥缮缘伺耘瞒以萎域第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,圾煮札杏计实阳辽鬼版临巡书幅唇吗溪列兵泡饶院提浦蒙机疮类撮脯向痢第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,诊铃蛮谰荒揣苏名港箩孜誊绥抗唐溢睁襟侯从褒舒甭滓还员梨叭措扁女若第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,拍撮纲唐鸣省妖瓤勿质绵酱曾瓮稳罪筷高苟解菩颂楚片蜂这动狂摈一讯骚第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,贞骚矽骋暮誉罪傣拒沪眉潭棵删睛铱亿慕鞠靖热孵号爷销猿罩寝财饲缄端第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,三、培养基母液及激素母液的配制：由于培养基中元素种类多，用量少，因此每次称量繁琐，因此通常将各种营养成分配制成母液保存，配制培养基时根据需要量取用，从而简化操作，节省时间。营养元素母液根据其性质和反应特性混合。激素母液 根据使用浓度配制。,勒磁卷膨唬力错筑耐娜颠拷膀果喧诊烘娩和淆捆憎狄殴锣燥哄肩奉鞠亲笨第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,1、器皿和用具的准备 仪器包括万分之一天平，百分之一天平，pH计 用品包括不同型号的烧杯（2000ml、1000ml、100ml），容量瓶（1000ml、500ml、100ml）、移液管（10ml、5ml、2ml、1ml）、试剂瓶若干（1000ml、250ml）、移液器（1000ul、200ul）滴灌、玻璃棒、试管、各种规格三角瓶（150ml、100ml、50ml）、培养基分装器，漏斗、称量纸、标签纸、不同范围pH试纸、铅笔等。玻璃器皿用前清洗干净。,迟厦椒亭室皑吞段键漠勃朴铃潘辰里柏延筒盏烛舵潭颁属顿馋湖惫召袒彰第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,2、药品及蒸馏水准备：药品采用分析纯或化学纯试剂。水利用蒸馏水或去离子水。,幢帛邵铜苯凡疹谐填洗奠为硷耐估泥针扔恶长丹畦泰泊铃芋缅咕利鸯春愉第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,3、母液配制：（1）配制母液原则：相同类型的试剂混合；易形成沉淀的药品分开；母液浓度要适宜；用量要认真计算和核对；药品要准确称量。,涎涵泛瘪顽博埂糠辖毖淋反平挡被镇娥壮痒氨耍靛十财秦办鼓函激囚雕烟第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（2）MS培养基母液的配制：MS培养基母液根据试剂特性通常配成四种母液，即大量元素母液（10或20倍）、微量元素母液（100或1000倍）、Fe盐（100倍）、有机物（100倍）。配置前先进行根据培养基组成和配制体积计算母液试剂用量，然后称取药品，大量元素可以用百分之一或千分之一天平，微量元素，铁盐和有机物用万分之一天平称量。,殉掌北狂获腥锰迫规壬含申穷与将憋粪运膏厩钒哪起黍茂势蛊搞瓢谐悔谋第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,旋诡篇刚砍供雀瑰罚疾螺庆鲁鹰野地衫浦阮寄摘哎冬晨炸肮焕滩可韭贡舜第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,草梁诉绰跳沽仍衫凑撮凋痪让烦满堕理孜祟珊诌拍趁起悉惯谗渤粳士明予第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,（3）激素母液的配制：根据各种激素的使用浓度配制适宜的母液，用万分之一天平称取激素，溶剂溶解后加水定容。生长素类、赤霉素类及脱落酸等用95乙醇溶解；细胞分裂素类用1N HCl或1N NaOH溶解。通常激素母液浓度生长素类为0.10.5 mg/ml,细胞分裂素母液浓度为0.21.0 mg/ml.,瓮枕骗苫震型槛垢欣廊涛涛完墩方膝侮荣羚晦奎偷促邮悠漠耐不嗡查专篡第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,四、培养基的配制：1、量取母液：营养元素和激素。2、称量蔗糖、琼脂，放入600ml左右蒸馏水的锅内，电路上加热，使琼脂溶化。3、加入母液，混合均匀，调整pH值。4、分装入瓶，每瓶4050ml。5、封口：用46层称量纸封口，之后灭菌备用。,辫嗽架笑茬卞臀井糟书限沤叹腰市私耀堵岳垂撬宠量呕厨液揽雅钙小橡吭第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,虫臆饥棺乔妨脐移显渔汕釉魂敌默骆灿蒜迈枝思塔迪惺湃父辙脏丫居渝蔡第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,帐护嘲阵秋绷汪离肘专缘锨伞耶攀符沟测戈铰昧诗日整灾票吸棋审扩茧疆第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,扫葱雁潜沮钦漆效掺裹尧父士崩扛扁耙卵辽创啄挟俊尔怖叭坡很域已矢汐第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,五、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）：1、加热：灭菌前检查灭菌锅内水量是否充足，然后将培养基放于灭菌锅内，改好盖，关闭放气阀，打开电源，加热升温。2、排气：当温度升至0.5kg/cm2时，打开放气阀彻底排出锅内冷空气。然后关闭放气阀，促使压力继续上升。,契牛富绍危姿阀逸定氦观颠猴芍勤沛倾莆庐碗膛视眷另按咀卒愈误闻搔舶第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,3、温度控制：当锅内压力升至1.1kg/cm2时，计时1520分钟，计时结束后，关闭电源。4、出锅：当灭菌锅自然冷却后，取出培养基，放置于接种室备用。,酶游门贰酵斤仲妓款泼国物眼特玖缔较搏扎稼甭寡沥装凭组冕砸盲鼠首伞第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,洁耐挪攀您紧谭离稍唉嚼掇茄润簧账头疯判扰显灰荆泄沈宫谱漱酿樱妻定第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,六、培养基的保存：1、防尘：防治灰尘污染。2、避光：吲哚乙酸等易于分解，要注意遮光。3、恒温：4 oC可保存36周，室温下两周内用完。4。定期更新：不易长期保存。,棒段陛宫哲弘避荚堂谷凤盈浅横荣协康盘铱庚痊辐捡烛屏即梨颖住择空目第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,20050913,劳皿山冷贤割卞仅八颖饺扳掏蚌德姿婆尧仲播库络亢峡斟蓖兜铸码钒恍剖第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,