超临界萃取新在中药提取分离中的应用.doc

超临界萃取新技术在中药提取分离现代中药生产新技术应用简况    中药生产技术与工艺现代化是我国中药产业面临的主要问题。20世纪80年代以来，中药生产技术及工艺项目有了迅速发展，但相当数量的中成药仍未能改变“粗、大、黑“的面貌。因此，开发研究适合中药生产的新技术、新工艺已经成为广大中药工作者急切而艰巨的任务。笔者就目前亟待推广与进一步研究的中药提取、分离、纯化以及制剂方面的现代工艺技术作一简述。1 超临界流体萃取(SFE>技术超临界流体(SCF>是温度与压力均在其临界点之上的流体，性质介于气体和液体之间，有与液体相接近的密度、与气体相接近的粘度及高的扩散系数，故具有很高的溶解能力及好的流动、传递性能，可代替传统的有毒、易燃、易挥发的有机溶剂。最常用的SFEC02因为具有临界条件温和(Tc=313”C，Pc：748×106Pa>，对大部分物质显化学惰性，五色、无味、无毒、无溶解污染，易制成高纯度气体和不易燃等优点，被广泛应用于石化分析和脂肪分析等领域。近10年来，SFEC02技术在中药生产领域得到了广泛的应用。鉴于C02流体是非极性的，故适宜于对极性小的中药成分的提取，尤其适宜于提取挥发性成分。目前，通过调节温度、压力、加入适宜的改性剂(如甲醇等极性大的溶剂>等方法，SFEC02已成功地从中药中提得挥发油、生物碱、苯丙素、黄酮类、有机酚酸、苷类、萜类以及天然色素等成分这项技术不仅可提高提取效率，还可保存大量热不稳定、易氧化成分及提取含量低的成分(如奎宁碱>因为我国在超临界C02萃取装置的工业化开发和生产方面的迅速发展，已在某些中药及其它天然活性物质萃取技术方面达到产业化规模，如青蒿素浸膏、蛇床子浸膏、姜黄浸膏、胡椒精油、广藿香精油、肉豆蔻精油、深海鱼油精因为超临界提取是在超高压系统内进行，压力可达 7500PSI因此，压力容器需要国家认证，操作时一定要注意安全。2 微波协助萃取微波是波长介于Imm一1m(频率介于3×1083×109Hz>的电磁波。微波在传输过程中遇到不同的物料会依物料性质的不同而产生反射、穿透、吸收现象。极性分子接受微波辐射能量后，通过分子偶极以每秒数十亿次的高速旋转而产生热效应。微波协助萃取过程中，透过对微波透明的含水量高，故而吸收微波能很快升温，使细胞的压力增大。当内部压力超过细胞壁可承受的能力时，细胞壁破裂，于是位于细胞内的有效成分自由流出，进入萃取剂而被溶解。过滤除去残渣，即可达到萃取的目的。微波萃取在薄荷和蒜油的提取中已有应用3 大孔吸附树脂应用新技术近几年来，因为大孔吸附树脂新技术的引进，使中草药有效单体成分或复方中某一单体成分的指标得到提高。它具有快速、高效、方便、灵敏、选择性好等优点，因而发展速度很快，应用面很广。31 大孔吸附树脂在中药有效成分纯化中的应用大孔吸附树脂用于白芍总苷、甜叶菊苷、刺玫果苷、三七总苷、西洋参总皂苷、绞股蓝总皂苷、甘草酸、三棵针生物碱、丹皮酚、银杏叶黄酮、制川乌和制草乌中总生物碱、薄盖灵芝中尿嘧啶和尿嘧啶核苷、川芎嗪和阿魏酸的分离。32 大孔吸附树脂在中药复方制剂中的应用章氏12>采用D型大孔吸附树脂法测定了三七及其制剂冠心宁总皂苷。也有人将三七蜂王浆用Dzol柱处理，测定三七皂苷的含量，回收率为1044刘氏等在对复肢胶囊(含有三七等25味中药>的复方制剂进行内控实验中，采用大孔吸附树脂吸附法有效地分离三七皂苷，并进行了 TLC定性鉴别，结果斑点分离度好，具有较好的重现性。任氏等s采用大孔吸附树脂D型(天津骨胶厂>纯化气血注射液、生脉注射液中的人参总皂苷。胡氏等L6>采用大孔吸附树脂分离一比色法，测定生脉注射液中的人参总皂苷，结果提高了分离效果减少了影响因素，使样品含量重现性好，平均回收率达1001以上。苯乙烯苷类是肉苁蓉的有效成分，大孔吸附树脂(ABB型>对苯乙醇苷类成分有较好的分离性能17>采用Dlol型大孔吸附树脂能纯化黄芪中的黄芪甲苷寿氏用低极性的GDXl04大孔吸附树脂，分离纯化疏肝止痛片中芍药苷成分。钟氏以壳聚糖为絮凝剂，采用树脂M为吸附剂，对龟鹿补肾液的生产工艺进行了改进结果新工艺比原工艺减少了一步浓缩，而且壳聚糖、树脂M的成本比酒精低，可缩短生产周期，减少能耗，降低生产成本，提高生产效率。王氏等采用南开大学生产的X5大孔吸附树脂分离纯化龟鹿补肾液中的淫羊藿苷成分。经X5吸附树脂处理后的样品，可有效地除去部分杂质，使其在高效夜相色铺中达到理想的分离效果。鉴于大孔吸附树脂一般是以聚苯乙烯为骨架，合成时使用了小分子的致孔剂、交联剂等，用前需要处理，并在提取物和制剂中检测其残留量。应符合要求。另外，因为大孔吸附树脂属于极性吸附，一种树脂只能对某一极性段的成分具有良好的吸附，故一般适宜于单味药中某类成分的定向提取。中药复方成分非常复杂，仅用某种树脂很难兼顾到所有成分，国家不鼓励中药复方使用大孔吸附树脂精制，使用时应该非常慎重。4 中药澄清技术在我国中药制药工业中，对中药提取液的澄清常用醇沉法，但很多报道认为将乙醇作为澄清剂有诸多不合理性。如把不溶于醇的无机物作为杂质除去是不妥的，许多具有生物活性与免疫作用的蛋白质、多糖也极易被醇沉淀。另外，醇沉工艺时间长、成本高，损耗乙醇量一般在30以上。近年来，一些新材料、新技术开始应用于中药提取药液的澄清，不仅可降低成本、缩短生产周期，也能保证制剂稳定性及有效成分的含量41 101果汁澄清剂101果汁澄清剂为水溶性的胶状物质，安全无毒，不引入杂质，并可随沉淀后的不溶性杂质一同除去，通常配成 5的水溶液使用。有研究证明，101澄清剂应用于黄芪、茯苓提取液的澄清，能保证药液中氨基酸与总有机酸等有效成分的含量应用于麻黄、莲子心、黄连等提取液的澄清，能保证药液中生物碱的含量。42 甲壳素甲壳素是一种含氨基多糖的天然高分子物质，带正电荷，可沉降药液中带负电荷的悬浮物。有人将其用于生脉饮的澄清，效果优于醇沉工艺用于白芍水提液的澄清。不影响芍药苷的含量。有人将壳聚糖(脱乙酰甲壳素>用于黄芪口服液的澄清，既能除去杂质，又不影响黄芪甲苷及多糖的含量将壳聚糖用于陈皮、红花等中药浸提液的澄清，证明能起到一定的澄清作用，且能保留葛根、补骨脂、槐M、降香等药物中的有效成分。但大青叶中的靛玉红、紫苑石油醚提取物中的有效成分，在絮凝液中含量偏低，提示若有效成分水溶性较小时，用壳聚糖作为澄清剂应慎重43 Z7C天然澄清剂ZC天然澄清剂可除去鞣质、蛋白质、胶体等不稳定成分不影响中药中黄酮、生物碱、苷类、氨基酸、多肽、多糖等。有人将其用于荆防口服液的澄清，效果满意应用于八珍口服液的澄清，药液中芍药苷、氨基酸、多糖、总固体的含量高于水醇法所得药液。药理实验也证明该法所得药液的作用优于八珍丸,主要有以下因素限制了澄清剂的使用。澄清剂一般是溶于水的。澄清后溶液中残留较多。到目前为止，国家没有批准任何一种澄清剂可以药用，均处于实验阶段。5 膜分离技术膜分离技术是利用天然或人工合成的，具有选择性的薄膜，以外界能量或化学差为推动，对双组分进行分离、分级、提纯或富集的技术。自20世纪90年代以来，膜分离技术以其高效、节能、绿色等特点在中药制剂生产中的应用越来越多。根据被分离物粒或分子的大小及所采用膜的结构可以将压力差驱动的膜分离过程分为微滤、超滤、纳滤与反渗透，四者组成了一个可分离固态微粒到离子的四级分离过程。从中药生产工艺和中药配方分析，微滤、超滤、纳滤和反渗透4种膜过程都将在中药的分离浓缩中发挥各自的作用。全氏等对超滤法和水醇法制备的补骨脂素注射液进行比较，结果表明超滤法工艺流程短，有效成分损失少，产品色泽深且證明度好。薄层色谱表明，其中所含的主要有效成分补骨脂素及异补骨脂素均高于水醇法。超滤法用于口服液的制备已经有许多报道。如在人参精口服液、海龙蛤蚧精口服液、四逆汤口服液、心脑脉舒口服液等得到较好的应用。郭氏等L11将大孔吸附树脂和超滤联用，精制六味地黄丸，得到的提取物重量只有原药材的40，而7060的有效成分被富集。结果表明：两者联用可发挥各自的优势目前，超滤法在制药界得到了较为广泛的应用，用来滤除高分子杂质、微生物、热原等，具有较好的应用前景。6 气流粉碎技术在中药精细加工中的应用气流粉碎技术是利用物料在高速气流作用下获得的巨大动能，在粉碎室中造成物料颗粒之间的高速碰撞、剧烈摩擦，同时，高速气流对物料产生剪切作用，从而达到粉碎物料的目的。它能将原料加工成极细的粉末(粒度<fOrum>。因此，在许多特定的粉体领域占有特殊的地位。气流粉碎技术具有如下特点：粉碎温度低。可粉碎热敏性、低融点的物料。根据高速喷射气流的焦耳一汤姆逊效应，当物体有喷嘴喷射而绝热膨胀时，气体会自身泠却，从而抵消了物料碰撞和摩擦产生的热量。生产周期短，收率高。因为高速碰撞与密闭粉碎，物料间彼此碰撞的概率大，粉尘亦无泄漏。可获得高纯度(污染少>、粒度分布均匀的产品(累记频率达D95以上>。对一些不得用湿法粉碎的物料，也能用气流粉碎进行干法粉碎，可获得均匀细小的粉末。可实现多种联合操作，粉碎同时可实现干燥操作目前，利用气流粉碎技术开发的中药品种还很少，主要局限于一些作用独特的名贵细料中药，已见报道的有西洋参、人参、珍珠、三七、花粉等，尚末进入大规模的工业化生产阶段。7 薄膜包衣技术在中药制剂中的应用目前，全国中成药片剂有1000余种，而糖衣片要占70以上。糖衣片存在很多不足之处：使用的辅料滑石粉、蔗糖约占片重的3050，不仅使片重增加，也使患者的用药范围受到限制。生产周期长，抗湿性能差，易变质、潮解、裂片。因为工艺操作需要熟练操作人员掌握，而且因为人的技术素质和精力的变化，容易造成不同 批次药物包衣质量的较大波动。改用薄膜包衣，可以弥补糖衣片的上述不足之处。薄膜包衣具有以下特点：包衣后片重增加极少，基本上减少或不用滑石粉等辅料。如有的产品采用薄膜包衣后，不仅方便了患者服用，而且减少了服用剂量。生产周期短，操作简便，干燥速度快，药物受湿热影响小，有利于提高产品质量。薄膜包衣材料品种繁多，具有广泛的选择性，而且可以利用设计不同的包衣处方，使形成的剂型能在一定的pH值范围内溶解或崩解，也可通过控制膜的通透性，达到定时、定位释放药物，使药物更有效地发挥作用。因为薄膜包衣形成的薄膜在2040ram，因此，药品可保持原制作形状，原来在片剂表面的标记也可以不受影响。薄膜包衣辅料不仅能用在片剂包衣方面，而且还能应用到颗粒剂、胶囊剂、丸剂的包衣上。薄膜包衣比糖衣具有更大的抗湿、抗热性，从而使薄膜包衣的药物制剂具有更大的稳定性，延长了药物的保存期限。有人将首乌薄膜包衣片与糖衣片进行比较研究，考察了其崩解度、硬度、水分、外观、片重及操作时间等，结果从外观看，首乌薄膜衣片无粘连、变色、裂片，而且不易受湿热条件影响，崩解、硬度、水分变化小。首乌薄膜衣片重量轻，薄膜衣仅占片芯重量的60左右，同时薄膜片操作时间短(约4h，糖衣片需16h>。在中药妇宁胶囊、灯盏细辛胶囊工艺研究中采用薄膜包衣技术解决了吸潮问题，稳定性大幅度提高。在金蟾定痛微丸、补脾益肠丸包衣材料选择及工艺改进研究中。以高分子材料作薄膜包衣材料，大大提高了产品的质量和生物利用度，。另外，酶项目技术、发酵技术、荷电提取技术、仿生提取技术、干压制粒技术、动态逆流分布提取技术、固体分散技术等高新技术均有良好的应用前景。 中的应用一、 中药产业化形势及应用新技术的意义    中药为我国传统医药，用中药防病治病在我国具有悠久的历史。因为化学药品的毒副作用逐渐被人们所认识及合成一个新药又需巨大的投资，西医西药对威胁人类健康的常见病、疑难病的治疗药物还远远不能满足临床的需要，因此，全世界范围内掀起了中医中药热。面对科学技术，特别是医药工业的迅猛发展，国际间医药学术交流活动的日益频繁以及药品市场竞争越来越激烈，实现中药现代化，与国际接轨，已成为中医药工作者的共识。改革开放到党的十五大，我国明确了中药发展的战略方向和思路，提出"科教兴业"的战略主体目标，中药的发展迈进了一大步。中药生产中的大桶煮提、大锅蒸熬及匾、勺、缸类生产器具当家的状况大为改善，进而出现不锈钢多功能提取罐、外循环蒸发、多效蒸发器，流化干燥器等设备，中成药的剂型也有较大的发展，由丸、散、膏、丹剂为主发展成为具有颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液及少量粉针等剂型。中药产值比1979年翻了五番，约占医药工业产值的30%以上。然而，我国现阶段创制的中成药还难以在国外注册、合法销售与使用。从目前全世界天然药物的贸易额来看，中国仅占1%左右，与天然药物主产国的地位极不相称。其原因主要是产业现代项目技术水平不高，制备工艺和剂型现代化方面还很落后；生产过程的许多方面缺乏科学的、严格的工艺操作参数，不仅导致了消耗高、效率低，而且还出现有效成分损失、疗效不稳定、剂量大服用不方便、产品外观颜色差、内在质量不稳定；同时还出现缺少系统的量化指标，大多数产品缺乏疗效基本一致的内在质量标准；许多复方制剂还难以搞清楚其作用的物质基础。"丸、散、膏、丹，神仙难辨"的状况尚未根本改变。要改变这种现状，让西方医药界接受中药，增强中药在国际市场上的竞争地位，主要途径是，以中药理论为指导，采用先进的技术，实现中药现代化。中药产品现代化的重点可简单地用8个字来描述，即"有效、量小、安全、可控"。实际上，它涉及范围十分广泛，要解决的问题比较复杂，但首先最关键的问题就是要提取分离工艺、制剂工艺现代化，质量控制标准化、规范化。为此，许多医药专家多次提出要采用超临界流体技术、分子蒸馏技术、膜分离技术、冷冻干燥技术、微波辐射诱导萃取技术、缓控释制剂技术、各种先进的色谱、光谱分析等先进技术，进行中药研究开发及产业化。在国家有关部门的主持下，1998年3月底，来自全国及香港20多个单位的60多位专家学者聚集厦门大学，探讨了中药现代化问题，特别是中药复杂体系中重大科学基础问题，超临界流体技术、分子蒸馏技术、液质联用等同时也被提出来。     超临界CO2萃取技术、分子蒸馏技术、超重力场技术是目前国际上较新的三大提取分离技术、采用这些技术对中药进行提取分离纯化，对实现中药现代化具有重要意义。     我们东宇集团经过二年的努力，已完全具备生产超临界试机1L-20的能力。同时已完成大规模超临界机组从100L-1000L的研制、设计及生产。东宇集团率先在全国制造完成自动化大型超临界机组，从而实现了超临界机组的远程监控及微机管理，并已在青岛安装完毕。中国作为全球中药材大国，随着我国入世的临近，更应在推动中药现代化、成果产业化进程中发挥重要作用，使中国的资源优势转化为经济优势，并使我国中药现代化的重大举措得以实现。 二、 超临界CO2流体萃取新技术在中药提取分离中的应用     超临界流体<Supercritical Fluid,简称SF或SCF）是指超临界温度<Tc）和临界压力<Pc）状态下的高密度流体。超临界流体具有气体和液体的双重特性，其粘度与气体相似，但扩散系数比液体大得多，其密度和液体相近。超临界流体对物质进行溶解和分离的过程就叫超临界流体萃取<Supercritical Fluid Extraction,简称SFE）。其基本原理为：CO2的临界温度<Tc）和临界压力<Pc）分别为31.05和7.38MPa，当处于这个临界点以上时，此时的CO2同时具有气体和液体双重特性。它既近似于气体，粘度与气体相近；又近似于液体，密度与液体相近，但其扩散系数却比液体大得多。是一个优良的溶剂，能通过分子间的相互作用和扩散作用将许多物质溶解。同时，在稍高于临界点的区域内，压力稍有变化，即引起其密度的很大变化，从而引起溶解度的较大变化。因此，超临界CO2可以从基体中将物质溶解出来，形成超临界CO2负载相，然后降低载气的压力或升高温度，超临界CO2的溶解度降低，这些物质就沉淀出来<解读）与CO2分离，从而达到提取分离的目的。不同的物质因为在CO2中的溶解度不同或同一物质在不同的压力和温度下溶解状况不同，使这种提取分离过程具有较高的选择性。 1、 超临界CO2流体萃取技术在中药现代化中应用的优越性     用超临界CO2萃取技术进行中药研究开发及产业化，和中药传统方法相比，具有许多独特的优点。     11 萃取能力强，提取率高。用超临界CO2提取中药有效成分，在最佳工艺条件下，能将要提取的成分几乎完全提取，从而大大提高产品收率和资源的利用率。同时，随着超临界CO2萃取技术的不断进步，全氟聚醚碳酸铵<PFPE）的应用，把超临界CO2萃取扩展到水溶液体系，使得难以提取的强极性化合物如蛋白质等的超临界CO2提取已成为可能。     12 萃取能力的大小取决于流体的密度，最终取决于温度和压力，改变其中之一或同时改变，都可改变溶解度，可以有选择地进行中药中多种物质的分离，从而可减小杂质使中药有效成分高度富集。便于减小剂量和质量控制，产品外观大为改善。     13 超临界CO2临界温度低，操作温度低，能较完好地保存中药有效成分不被破坏，不发生次生化。因此，特别适合那些对热敏感性强、容易氧化分解破坏的成分的提取。     14 提取时间快、生产周期短。超临界CO2提取<动态）循环一开始，分离便开始进行。一般提取10分钟便有成分分离析出，2-4小时左右便可完全提取。同时，它不需浓缩步骤，即使加入夹带剂，也可通过分离功能除去或只是简单浓缩。     15 超临界CO2提取，操作参数容易控制，因此，有效成分及产品质量稳定。     16 超临界CO2还可直接从单方或复方中药中提取不同部位或直接提取浸膏进行药理筛选，开发新药，大大提高新药筛选速度。同时，可以提取许多传统法提不出来的物质，且较易从中药中发现新成分，从而发现新的药理药性，开发新药。     17 超临界CO2还具有抗氧化、灭菌作用，有利于保证和提高产品质量。     18 超临界流体萃取应用于分析或与GC、IR、MS、LC等联用成为一种高效的分析手段。将其用于中药质量分析，能客观地反映中药中有效成分的真实含量。     19 经药理、临床证明，超临界CO2提取中药，不仅工艺上优越，质量稳定且标准容易控制，其药理、临床效果能够保证或更好。     110 超临界CO2萃取工艺，流程简单，操作方便，节省劳动力和大量有机溶剂，减小三废污染，这无疑为中药现代化提供了一种高新的提取、分离、制备及浓缩新方法。 2、 超临界CO2流体萃取技术在中药提取分离及中药现代化中的应用方式及前景     从"八五"期间国家"八五"攻关项目"超临界CO2萃取技术在中草药生产中的应用研究与开发"到"九五"期间承担多项中国重点项目<有关SFE技术研究开发中药新药）以来，包括萃取分离研究和药理毒理研究及新药的开发研究，取得了重要的科技成果：证明了超临界CO2萃取技术可应用于中药领域；总结了SFE在中药中应用的规律性；提出较为适合中药萃取的超临界设备结构类型；总结了超临界CO2萃取中药的优越性，证明了用超临界CO2萃取中药，不仅工艺上优越，而且还能保持中药本身的药理活性；研究开发出一批具有较好前景的品种，有的已工业化，走向市场。 根据研究开发实践，认为超临界流体萃取技术应用于中药提取分离及中药现代化，具有较大的潜力和可观前景。SFE应用于中药，结合几个典型的研究开发实例，可将其分为如下几个方面。     21 SFE与中药有效成分或中间原料的提取     这一方面主要是指那些已具备质量标准的单体或有效部位的提取，往往本身就是产品，只要达到标准，便可进入市场。这是SFE技术应用于该领域中的较为容易进行的一个方面。     211超临界流体萃取法从黄花中提取青蒿素<Artemisinin）的新工艺。青蒿素来自菊科植物黄花蒿<Artemisia annua）的一种倍半萜内酯类成分，是我国唯一得到国际承认的抗疟新药。然而本应属于中国的东西，中国仅占国际市场份额的0.5%。传统的汽油法存在收率低、成本高、存在易燃易爆等危险，用SFE工艺，从0.1升、5升设备小试到25升、50升设备中试放大，一直到200升设备的工业化生产证明，超临界CO2萃取工艺可用于青蒿素的生产，青蒿素产品符合中国药品标准。超临界CO2萃取工艺比传统法<如汽油法）优越，产品收率提高1.9倍，生产周期缩短约100小时，成本降低447/Kg，可节省大量的有机溶剂汽油，避免易燃易爆的危险，减少三废污染，大大简化生产工艺。该新工艺已取得发明专利证书。在最近召开的中国青蒿素成果产业化发展战略研讨会上，已初步决定推广这种新工艺，以达到占国际市场份额的3-5%的目标。     212 贯叶连翘提取物的超临界CO2萃取 贯叶连翘提取物是目前国际流行的十大植物提取物之一，主要用于治疗忧郁症。提取物是用贯叶连翘药材经水煮或醇提、浓缩、干燥而得。采用超临界CO2萃取工艺，达到出口标准，比传统工艺优越。     22 SFE与中药化学成分的研究     这里主要是指超临界CO2萃取分离技术应用于中药有效成分的研究或中药化学成分的系统研究，即植物化学范畴。它是新药研究的基础。用超临界CO2萃取技术进行植物化学的研究，可大大简化提取分离步骤，能提取分离到一些用传统溶剂法得不到的成分，节约大量的有机溶剂。     221 红豆杉中紫杉烷类化学成分的研究 红豆杉中紫杉烷类成分的提取分离，传统的植物化学分离要得到单体纯品难度较大，步骤较为繁琐，原料经多次浸提浓缩后，有机溶剂多次萃取，再进行多次柱层析，此过程中，要用多种有毒的有机溶剂，如氯仿或二氯甲烷等。我们用超临界CO2萃取技术对云南红豆杉<Taxus yunnensis）的化学成分进行研究，经超临界CO2提取3小时所得粗浸膏，含杂质较少，较易分离到单体，该浸膏只需进行一次硅胶柱层析就能得到6个紫杉烷类单体和2个其它单体，UV、IR、HNMR和CNMR、MS等光谱分析和化学鉴定，它们分别为紫杉醇<taxol）,taxuchin A,taxinine E,taxinine J,baccatin III,1-hydroxybaccatin I及-谷甾醇和硬脂酸-1-甘油酯，得率较溶剂法高。     222 姜黄<Curcuma longa）油化学成分的研究及姜黄油提取 超临界CO2提取姜黄油，其收油率是水蒸汽的1.4倍，生产周期只是旧工艺的1/3。对所得的姜黄油进行GC/MS分离鉴定，其化学组成主要由姜黄酮等26个成分组成，其组成与水蒸汽的差不多。姜黄油的超临界CO2提取已应用于生产中。用超临界CO2进行中药挥发油或脂肪油化学成分的研究较为简单，只要1-2个小时提取油后，直接进行GC-MS-计算机联用技术分析，即可鉴定油中化学成分。在黄花蒿、当归等挥发油的研究中，SFE能提取出水蒸汽蒸馏法提取不出的成分。     23 SFE与名优中成药生产工艺改革及二次开发     我国现行生产的很多中成药是经长期的临床实践开发出来的。但因为生产工艺落后，存在质量不稳定、服用剂量大、外观颜色差、疗效未能充分发挥、缺乏可控的质量标准等问题，加之药效、安全性评价等原因，难以进入国际市场。采用SFE等先进技术进行工艺改革或二次开发，是实现中药现代化较为快捷的途径，是一个较为重要的方向。     231 复方丹参制剂中丹参提取的工艺改革 丹参酮类是从唇形科植物丹参<Salvia miltiorrhiza）中提取的总酮类及其它成分的总称，是制备各种丹参制剂如复方丹参片，丹参酮IIA磺酸钠注射液<主要用于心脑血管病）和丹参酮胶囊<主要用于抗菌消炎）原料主要成分，其中，丹参酮IIA是药典规定用于质量控制的有效成分，各药厂的提取方法主要是乙醇热回流提取，然后浓缩成浸膏，用于各种制剂。因为提取能力差和长时间加热提取或浓缩，有效成分损失严重，往往浸膏中丹参酮IIA含量在0.15%-1%左右，再做成制剂，往往丹参酮IIA检测不出或含量太小，药典标准都难以达到，近几年国家取消不少药厂的复方丹参片制剂的生产批文，原因大多与此有关。我们用超临界CO2萃取法对此进行了工艺改革，从小试到中试直到生产证明，收率比旧工艺高，生产周期缩短，有效成分丹参酮IIA高度浓缩，含量平均20%，最高可达80%左右，此工艺已应用于多个药厂的复方丹参制剂<如复方丹参片）的生产，并保持了应有的临床效果。     232 大蒜注射液的工艺改革 大蒜注射液为临床上广泛应用的中药制剂，传统的生产工艺是水蒸汽蒸馏配制而成。用超临界CO2萃取法对此工艺进行改革，并应用于临床。结果证明，不仅工艺优越，而且还能提高疗效。SFE制剂对粘膜真菌感染性疾病，总效率提高18.42%；对深部真菌感染性疾病，总有效率提高33.34%。     233 柴胡注射液的工艺改革 柴胡为伞形科柴胡属植物，具解表、退热、疏肝解郁之功能。其主要有效成分为挥发油和柴胡皂甙。因为柴胡注射液有较好的退热、解表效果，国内许多制药厂家一直用水蒸汽蒸馏法提取挥发油制成柴胡注射液。近来有报道，柴胡注射液具有抗抽搐作用，且毒性低，起效时间长，可能会成为一种抗癫痫辅助药，但因为柴胡注射液中挥发油浓度低，用药剂量大。而用传统的水蒸汽蒸馏法生产存在产油率低、操作温度高、成分易损失等问题。柴胡皂甙有明显的中枢抑制作用和抗炎作用，还具有特异性阻碍胆碱酯酶和显著的利尿作用，对于柴胡皂甙的提取，因为传统工艺温度高、受热时间长，某些柴胡皂甙含量降低或损失殆尽。运用超临界CO2萃取技术对柴胡挥发油及其皂甙进行提取分离，工艺上显示了极大的优越性。该挥发油及皂甙具有较好的解热、解表及抗癫痫药效学作用，效果强于传统工艺的。     234 穿心莲片的工艺改革 该品种为药典品种，销售量较大。但药典工艺是用85%乙醇提取2次，然后浓缩成浸膏，做成制剂。因为提取力差及浓缩的破坏，致使片中脱水穿心莲内酯达不到药典要求，影响疗效。采用SFE工艺，可极大地提高有效成分的含量，降低成本，与传统工艺比具有极大的优势。     24 SFE与单方中药新药的研究与开发     单味中药制剂是传统中药制剂的一部分。用SFE对单味中药进行提取工艺、药理毒理研究及新药的开发在国内仍然是一个空白。此过程中，既要考虑有效部位的提取效率，又要考虑药理毒理效果。     241 蛇床子有效部位的超临界CO2提取及治疗妇科炎症药效学研究 蛇床子为伞形植物蛇床<Cnidium monnieri）的果实。传统的中医主要用于妇科炎症的治疗。采用超临界CO2提取，工艺上表现出有效成分收率高，提取时间短及有效部位高度浓缩等优越性，但药效上是否保持传统中医的药用效果？为此，按照新药审批的有关要求，对蛇床子超临界CO2提取的有效部位进行抗妇科炎症的药效学研究，结果证明蛇床子用超临界CO2工艺提取有效部位进行新药开发，不仅工艺优越，质量上稳定且容易控制，而且，还能保持传统中医的治疗效果。     242 苦参总碱的超临界CO2提取及苦参总碱注射液二类新药的研究     25 新复方中药超临界CO2提取及新药研究     在中药领域，用超临界CO2萃取技术对中药新复方进行提取工艺研究及新药开发也是一个空白。中药复方是传统中药的最主要的部分，也是中药与国际接轨难度最大的部分。医药同行多年来进行了大胆的探索，目前在国家主管部门的主持下，组织了"中药复杂体系中重大科学问题探讨"，计划对复方中药进行跨行业、多学科交叉、全方位的研究与开发，以解决中药复杂体系中重大科学问题，实现中药现代化。其中，超临界流体技术被推荐为中药复杂体系中中药产业现代化的新技术之一。首次用SFE技术对中药复方进行的研究证明，中药复方的研究与开发可以应用SFE新技术。     251 复方雪莲栓剂二类新药的研究     在对几味单方中药SFE研究<包括药效学）的基础上结合传统中医理论组成的一个中药复方。在用SFE技术对该复方新药进行研究过程中，我们发现：按处方比例混合四味中药并粉碎后，投入萃取釜中，在合适的SFE参数条件下，四味中药中的有效成分均被提出<TLC、HPLC、GC等配合检测），提取效果和单味中药提取效果差不多。复方提取时，有效部位<浸膏）收率比单味提取有所增加，如四味中药分别单独提取时，有效部位收率分别为6.96%、2.13%、2.51%、4.36%，复方提取有效部位收率达7.25%。复方浸膏收率比单味浸膏收率高，有可能是因为复方提取时，一些中药成分的提取因为互溶作用，促进其它中药成分的提取。按照此类中药复方的传统用药和提取方法，进行了该复方的传统提取，发现此复方浸膏的收率高达9.7% ，比SFE的 7.25%高0.34倍，然而其中有效成分，比SFE提取低近40倍。说明传统复方提取杂质多，有效成分少，外观颜色差，且批与批间重复性较差，而复方的SFE提取，有效成分高度浓缩，杂质少，外观颜色较好，批间重复性较好。药效学证明，该复方的SFE有效部位，具有传统中医所要求的药效，且复方后具有协同补充效果。该新药已基本完成了临床前研究。     252 复方香薷三类新药的研究     26 SFE技术与中药质量标准     质量标准是影响中药进入国际市场的又一重要因素。采用先进、准确的分析方法进行中药质量控制有利于中药现代化。曾有报道分析型超临界CO2流体萃取技术用于药物分析具有省时、样品用量少、条件易于控制、不分解也不污染样品等优点，特别是能从复杂基体中分离、鉴定痕量组分。因此，对成分复杂的中药特别是复方中药的分析就为适用。特别值得提出的是，它应用于分析可能更为准确客观评价所要分析的有效成分的含量。如青蒿和穿心莲药材中青蒿素和脱水穿心莲内酯的含量测定，用超临界CO2提取为前处理，测出含量比经典分析方法的高。 3、 结束语     31 超临界CO2萃取新技术完全可用于改造传统中药产业，和传统中药生产工艺比，具有极大优越性和市场潜力。这一领域将是超临界CO2萃取技术的主要方向。     32 超临界萃取技术应用于中药或天然药物，要从单纯的进行中间原料的提取转向于兼顾单味、复方中药新药的开发应用或对现行我国生产的各优中成药工艺改革或二次开发上，以及配合我国正在进行的中药现代化战略行动。     33 SFE技术应用于中药，还要加强有关基础研究和应用研究。因为中药化学成分复杂，可分为非极性、中等极性和强极性三部分，对于前二类可以在不加或加入夹带剂下提取。但对强极性化合物如蛋白质、多糖类，曾经认为用超临界CO2提不出来，随着研究的不断深入，用全氟聚醚碳酸铵<PFPE）使CO2与水形成了分散性很好的微乳液，把超临界CO2应用扩展到水溶液体系，已成功用于强极性生物大分子如蛋白质的提取，为超临界CO2提取中药中一类具有特殊活性水溶性成分提供了新方法。这一研究提示，原来认为难以提取的成分只要加强类似的应用基础研究，包括国产设备工作压力提高的研究等还是可以解决的。     34 加强分析型超临界流体萃取或超临界色谱在中药分析中的应用，不断改革传统经典的分析方法。     35 虽然SFE技术在应用过程中面临设备一次性投资较大的问题，但和传统溶剂提取法相比，因为它在生产过程中投资较小，以及具有很多优越性，因此在实现中药现代化和国际接轨的战略行动中将会发挥较大的作用。