第5章血型与输血检验课件.ppt

第五章 血型与输血学检验,第五章 血型与输血学检验,第五章 血型与输血学检验,第一节 红细胞血型第二节 红细胞血型检测技术第三节 白细胞血型第四节 血小板血型第五节 新生儿溶血病第六节 临床输血第七节 发展趋势,主 要 内 容,第五章 血型与输血学检验,血型、血型抗原与抗体,血型 是人类血液的主要特征之一，表达了血液各种成分的抗原型别和遗传性状。血型抗原分类 1.红细胞血型抗原: ABO、 Rh、 MNS 等 2.白细胞血型抗原: HLA 、 CD等 3.血小板血型抗原: HPA等 4.其他血型抗原,第五章 血型与输血学检验,血型主要指红细胞血型是指红细胞膜上特异性抗原的类型。按人体血液中红细胞所含抗原及血浆中抗体不同而分为各种型别。,第五章 血型与输血学检验,血型抗原,第五章 血型与输血学检验,血型抗原的化学本质,种类：糖蛋白、脂蛋白、糖脂和蛋白质四种 糖蛋白：唾液中ABH抗原、Lewis、MNSs、HLA脂蛋白：Rh抗原糖脂：红细胞上、血浆中ABH抗原、P血型抗原多糖类抗原刺激产生IgM抗体蛋白类抗原刺激产生IgG抗体,第五章 血型与输血学检验,完全抗体(complete antibody) 在血型抗原物质刺激下形成，与红细胞生理盐水悬液混合后能引起红细胞凝集的特异性抗体，主要是IgM抗体。,血型抗体,不完全抗体(low-order antibody) 只可使红细胞致敏而不能使红细胞凝集的抗体，主要是IgG抗体。 血型抗体与红细胞血型抗原结合后，体内产生血管内或血管外溶血。体外产生凝集、沉淀或溶血反应。,血型抗体(Blood group antibody) 在血型抗原物质刺激下形成的免疫球蛋白。红细胞血型抗体可分为完全抗体和不完全抗体。,第五章 血型与输血学检验,第一节 红细胞血型,是红细胞上的遗传性标志。包括ABO、 Rh、MNS 、 P、 Lutheran、 Kell等。,第五章 血型与输血学检验,一、ABO血型系统,1901年，Landsteiner（1930年获诺贝尔生理和医学奖，“血型之父”）发现了人类的第一个血型系统ABO血型系统，根据人红细胞表面含抗原成分不同分成A、B、O和AB四种血型。,第五章 血型与输血学检验,血型分型：根据红细胞膜上是否存在凝集原与凝集原，血浆中是否存在对应抗体，将血液分为四种血型。 血型 抗原 抗体 A A 抗B B B 抗A AB A、B 无 O 无 抗A、抗B,第五章 血型与输血学检验,ABO血型系统遗传：,“三复等位基因”学说：第九号染色体上A、B、O三复等位基因控制A、B基因：显性基因O基因：隐性基因父母双方各遗传给子代一个基因，具6个基因型，4种表型。,第五章 血型与输血学检验,第五章 血型与输血学检验,基因型 表型 OO O AO,AA A BO,BB B AB AB,第五章 血型与输血学检验,ABO血型的遗传,父亲 母亲,表型 A B,可能的基因型 ？ ？,子女可能的基因型 ？,子女可能的表型 ？,第五章 血型与输血学检验,ABO抗原的生物合成,基因ABO及H控制着A、B抗原的形成，O基因为无效基因.,第五章 血型与输血学检验,酶A,+ N-乙酰半乳糖胺,A抗原,H抗原,酶B,+D-半乳糖,B抗原,基因H,基因 H,基因B,H抗原,酶A=-N-乙酰半乳糖胺基转移酶，酶B=D-半乳糖基转移酶,基因A,第五章 血型与输血学检验,基因H,H抗原,H物质上既不连接N-乙酰半乳糖胺，又不连接D-半乳糖，则仅有H活性，没有A、B抗原（为O型）,第五章 血型与输血学检验,Biosynthesis of antigen： basic material H酶 H antigen A酶 B酶 A antigen B antigen,=N-乙酰半乳糖胺 =D-半乳糖=N-乙酰葡萄糖胺 =L-岩藻糖,第五章 血型与输血学检验,现在我们知道A抗原和B抗原的合成是以H物质为前提的,O型红细胞也有H物质但不能产生A抗原和B抗原,基因,酶,合成抗原,在ABO血型物质合成过程中：,控制,控制,第五章 血型与输血学检验,首先是H基因控制的L-岩藻糖转移酶的合成，它使1分子的岩藻糖加在血型前体物质上，形成H物质(H抗原)：,IB基因控制合成B型转移酶，它将一个D-半乳糖分子加在H物质末端糖残基上，形成B抗原。,IA基因合成A型转移酶，它使一个N-乙酰基半乳糖胺加在H物质末端糖残基上，形成A抗原。,第五章 血型与输血学检验,A、B两种抗原的差异，只在于一个单糖残基的不同。 Io基因为无效等位基因、所以O型红细胞只有H物质，不能由此形成A抗原或B抗原.AB型红细胞受IA IB基因控制，能产生A和B两种抗原。,第五章 血型与输血学检验,ABO血型系统的分子基础,1. O型个体只能产生H物质(孟买型例外)； 2.H物质末端增加一分子的N-乙酰半乳糖胺（GalNAc)即成为A抗原； 3.H物质末端增加一分子的D-半乳糖(Gal)即成为B抗原。,第五章 血型与输血学检验,胎儿在56周已可测出，18个月完全表达。存在于多种细胞的细胞膜上和其他体液中。,ABO血型发生及分布,胎儿可产生ABH抗原出生时抗原的抗原性弱5-10岁时达高峰老年的抗原性下降,第五章 血型与输血学检验,ABO分泌型：分泌型和非分泌型受控于Sese基因ABH抗原不仅存在许多细胞上，还可分泌于许多体液中，体液中的可溶性ABH抗原又称为“血型物质”。凡体液中有血型物质者为分泌型，无血型物质者为非分泌型,血型物质,第五章 血型与输血学检验,血型物质存在的意义：,辅助鉴定血型 中和ABO血型系统中的“天然抗体”检查羊水，预测胎儿ABO血型等。,第五章 血型与输血学检验,ABO亚型红细胞上的A抗原,第五章 血型与输血学检验,亚型是指同一血型抗原的结构和性能或抗原位点数有一定差异所引起的变化。ABO血型系统中以A亚型最多见，A抗原的两个主要亚型是A1和A2 。,第五章 血型与输血学检验,检查亚型的目的,防止误定血型，避免输血反应A1与A2之间输血可能引起输血反应亚型抗原性弱，易漏检或误定,第五章 血型与输血学检验,1.孟买型：基因型：hh，表型：Oh，红细胞及体液无ABH抗原,血清中有其抗体2.B（A）型：红细胞上同时存在B抗原和很弱的A抗原，容易误判为AxB型。 A（B）型相仿。,其他特殊类型的ABO亚型,第五章 血型与输血学检验,1952年在印度孟买发现一种特殊的血型这种红细胞既无A抗原和B抗原，也无H抗原。他们的基因型为hh，不能产生H物质，即使有IA和(或)IB基因，也不能形成A抗原或(和)B抗原但IA IB基因可向后代遗传，这种特殊的型,称为孟买型,孟买型,第五章 血型与输血学检验,孟买型首先在孟买发现而得名,没有H抗原的O型基因型为hh，表现型为Oh红细胞和唾液中无H、A和B抗原，但血清中含有抗A、抗B和高效价的抗H抗体除与AB型红细胞发生反应外，还可与O型红细胞凝集如输血，只输Oh同型血,第五章 血型与输血学检验,ABO血型系统抗体,1.抗A、抗B抗体2. 抗A、B抗体 O型人血清中不仅有抗A、抗B抗体，还含有一种抗A、B抗体。,第五章 血型与输血学检验,出生后36个月才开始出现，510岁达高峰。产生抗体的功能可持续终身，效价随年龄增高而逐渐降低。新生儿血清中可检测出的抗体常是来自母体的IgG，偶尔也有胎儿自身产生的IgM。ABO血型抗体滴度变化大：O型人抗A滴度高于B型人B型人的抗A 又高于A型人中的抗B,第五章 血型与输血学检验,天然抗体 :是指没有可察觉抗原刺激产生的“抗体”，（菌类、花粉尘埃等）多主要存在于ABO、MN、P和Lewis血型系统中，以IgM和IgG共同存在，A型和B型血型抗体多数以IgM为主，O型人在成年后以IgG占优势，特别是女性 免疫抗体：指有可查抗原刺激而产生，常见有输血、妊娠和注射3种方式。规则抗体；指ABO血型系统有规律产生抗A和抗B，符合Landsteiner规则 是反定型的依据,第五章 血型与输血学检验,Antibody of ABO system,天然抗体 免疫性抗体,IgM IgG温度低时抗体滴度高 温度升高时抗体滴度也高容易被可溶性血型物质中和 只能部分被可溶性血型物质中和分子量 100万 分子量 16万不能通过胎盘 能通过胎盘在盐水中与相应红细胞发生 通常在盐水中不发生聚集，仅在酶聚集 处理或白蛋白溶液中发生聚集,第五章 血型与输血学检验,二、Rh 血型系统,概述 抗Rh抗体一般指抗-D。Rh血型抗原及抗体 1. Rh抗原：含D、E、e 、C、c五种，D抗原性最强。 2.Rh抗体：主要通过输血或妊娠免疫而产生。Rh抗体临床意义：引起输血反应或新生儿溶血病。,第五章 血型与输血学检验,发现: 恒河猴(Rhesus monkey)的红细胞家兔血清中产生抗体人RBC: RBC凝集者，为Rh() RBC不凝集者,为Rh() 分布: 白种人:Rh()85%;Rh()15% 汉族及大部分少数民族: Rh()99%:Rh()1% 有些民族:Rh()可达8.7%以上,第五章 血型与输血学检验,(一) Rh血型的抗原与分型 人类RBC膜上有C、c、D、E、e5种抗原，以D抗原的抗原性最强。 分型：Rh+：有D抗原为Rh阳性(汉族99) Rh-：无D抗原为Rh阴性 存在弱D抗原为弱D型，归为Rh阳性(二) Rh血型抗体的特点 主要是IgG,属免疫性抗体,可通过胎盘。 Rh阴性者接受Rh阳性血液后可通过体液免 疫产生抗Rh抗体。,第五章 血型与输血学检验,Rh抗原及亚型,1.Rh抗原 已发现40多种，与临床关系密切的有5种依其抗原性强弱排列：DECce临床上将含D抗原者为Rh阳性，无D抗原者为Rh阴性。,第五章 血型与输血学检验,Rh抗原亚型,Du ：弱D抗原，通常用抗D血清作凝集实验时为阴性或反应很弱。-D-（缺失型） 缺少E/e或既缺E/e,又缺C/c,只表现D。Rhnull 缺少全部Rh抗原,第五章 血型与输血学检验,Rh血型抗体,1Rh抗体产生 极少数是天然抗体，如抗E、抗CW 绝大多数：免疫性抗体2Rh抗体种类 5种，即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e 最常见的是抗D。,第五章 血型与输血学检验,1.Rh血型与输血Rh+血2.Rh血型与妊娠,Rh-患者,抗Rh抗体,再次输入Rh+血,溶血,第五章 血型与输血学检验,1. Rh血型系统中血清不含天然抗体 例: 输血 供血者(Rh阳性)而受血者(Rh阴性) 第一次输血无明显凝集反应,第五章 血型与输血学检验,2. Rh抗体主要是不完全抗体IgG，其分子小能透过胎盘例:,分娩时,胎儿RBC,胎儿(Rh阳性),胎盘,胎儿红细胞发生凝集和溶血(新生儿溶血),第二次怀孕：,第一次怀孕：,诱导孕妇(Rh阴性)产生抗D抗体,胎儿(Rh阳性),第五章 血型与输血学检验,Rh血型引起的新生儿溶血,第五章 血型与输血学检验,第五章 血型与输血学检验,第五章 血型与输血学检验,MNSs血型系统,M、N、MN、S、s、Ss型MN与Ss基因复合体MN系统抗M最常见，以IgM为主，抗N为冷凝集素抗S与抗s由红细胞免疫产生，能引起溶血性输血反应和新生儿溶血病。,第五章 血型与输血学检验,四、其它血型,. P血型系统: P抗原除存在于红细胞，还存在于成纤维细胞和淋巴细胞上。天然抗体通常不引起新生儿溶血病和溶血性输血反应。. Kell血型系统： 主要抗原是K和k，抗原性较强，抗K引起严重溶血性输血反应和新生儿溶血病。 . Kidd血型系统：抗原为Jka，Jkb ， 免疫抗体能引起严重溶血性输血反应。,第五章 血型与输血学检验,第二节 红细胞血型检测技术,凝集反应（agglutination）沉淀反应（precipitation） 溶血反应（hemolysis）,第五章 血型与输血学检验,一、凝集反应,第五章 血型与输血学检验,二、沉淀反应,第五章 血型与输血学检验,三、溶血反应（hemolysis）,第五章 血型与输血学检验,一、红细胞血型鉴定,ABO血型鉴定 Rh血型鉴定MN血型鉴定,第五章 血型与输血学检验,ABO血型鉴定,检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判断血型。 常规的方法包括正向定型与反向定型正定型：用已知抗体特异性的血清检查红细胞抗原反定型：用已知血型红细胞检查血清抗体,第五章 血型与输血学检验,ABO血型鉴定,1.正向定型2.反向定型,第五章 血型与输血学检验,ABO血型鉴定常用方法,盐水凝集法凝胶微柱法,第五章 血型与输血学检验,1盐水凝集法,ABO血型抗体一般IgM，属完全抗体IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表面排斥力，同时分子量较大，能与相应抗原特异性结合，在生理盐水中发生肉眼可见的凝集现象。,第五章 血型与输血学检验,简便，不需要特殊仪器玻片法：操作简单，不需要离心，适于大规模血型普查反应时间较长，易忽略较弱的凝集而导致定型错误。试管法：需时间短适用于急诊定型。可发现亚型或较弱抗原抗体反应，结果判断可靠，为常规检查方法。,第五章 血型与输血学检验,2凝胶微柱法,凝胶具有分子筛效应和亲合效应亲合效应：红细胞抗原与相应抗体结合分子筛效应：低速离心后，凝集红细胞悬浮在凝胶中或表面，而未被抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部。结果观察：肉眼/血型分析仪,第五章 血型与输血学检验,操作标准化，结果特异、准确可靠，重复性好、灵敏度高。可手工、半自动及全自动操作不足之处：需要特殊试剂和离心机成本较高。,第五章 血型与输血学检验,红细胞的常规ABO定型,正向定型 反向定型抗A 抗B 抗A,B A细胞B细胞O细胞 - - + - O+ - + - + - A- + + + - - B+ + + - - - AB,判断结果,第五章 血型与输血学检验,标准血清质量人ABO血型血清抗体 / 单克隆抗体,高度特异高效性抗A1：128 抗B 1：64高亲和力无冷凝集素/稳定性无菌灭活补体,第五章 血型与输血学检验,正定型的红细胞问题,标本新鲜，严防污染肠道细菌感染，红细胞出现类B抗原，与抗B血清凝集。抗原位点过少/弱/消失：婴幼儿、老年人白血病或恶性肿瘤血浆成分：可能影响鉴定结果，要用盐水多次洗涤红细胞。,第五章 血型与输血学检验,反定型的血清问题,标本新鲜，严防污染婴儿及老年人血清中ABO抗体效价较低，反定型时可出现不凝集或弱凝集。冷凝集素干扰血型鉴定。疾病影响：丙种球蛋白缺乏症：血清中缺乏抗A、抗B而不出现凝集或弱凝集某些肝病和多发性骨髓瘤：血清球蛋白增高引起假凝集。,第五章 血型与输血学检验,（二） Rh血型鉴定,1原理: （1）单克隆混合试剂检测法 用Rh抗血清（IgM+IgG型）试剂通过凝集反应对红细胞上Rh抗原进行鉴定。 （2）酶介质检测法 酶介质可破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，减少细胞间的静电排斥力，使细胞间的距离缩小，有利于IgG型小分子特异性Rh血型抗体与红细胞上的Rh抗原反应，形成肉眼可见的凝集。,第五章 血型与输血学检验,指D抗原的变异型，有些Rh阳性细胞能被一些抗D血清凝集，但不能被其他一些抗D血清凝集，实际上有D抗原,Du意义：Du抗原是一种弱抗原，可分不同等级，高等级可在盐水介质立即反应,献血者为Du型，应归Rh阳性,受血者为Du型，应归Rh阴性,D抗原和Du型,第五章 血型与输血学检验,（三）MN血型鉴定,1原理: 用IgM类特异性抗M、抗N单克隆血清来鉴定红细胞上有无相应的M抗原和/或N抗原。,第五章 血型与输血学检验,二、交叉配血实验,概念：血型配合性试验分类 1.“主侧”配血 2.“次侧”配血 3.自身对照,第五章 血型与输血学检验,献血者 受血者红细胞 红细胞血清 血清,主侧,次侧,供血者红细胞与受血者血清反应（主侧交叉配血） 受血者红细胞与供血者血清反应（次侧交叉配血）其目的是检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合的情况。,第五章 血型与输血学检验,二、交叉配血实验技术,1.盐水介质法 2.酶介质法 3.抗人球蛋白介质法4.凝聚胺法5.微柱凝胶免疫技术,第五章 血型与输血学检验,一、盐水凝集法,红细胞和抗血清在盐水溶液中直接反应，凝集或溶血为阳性特点是操作简便，设备简单，缺点是影响因素多，灵敏度低，不能检出IgG类不完全抗体,第五章 血型与输血学检验,二、低离子强度盐水法,通过降低介质溶液的离子强度，减少红细胞外围离子云的强度，促进IgG分子在两个红细胞间桥联，而促进凝集特点是缩短抗原抗体反应时间，提高反应灵敏度,第五章 血型与输血学检验,三、酶技术,利用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面唾液酸，使红细胞失去电荷，缩小细胞间距离同时改变红细胞膜表面结构，使某些隐蔽的抗原暴露，从而增强凝集反应主要用于一些不完全抗体的检测，盐水中可凝集,第五章 血型与输血学检验,四、抗人球蛋白检测法Coombs试验,在盐水凝集法或低离子强度盐水法的基础上，加入抗人球蛋白抗体，通过其特异性桥联作用，促进红细胞的凝集，用于检测不完全抗体,第五章 血型与输血学检验,第五章 血型与输血学检验,五、凝聚胺技术,原理：通过低离子介质降低溶液的离子强度，多聚季胺盐在介质溶液中产生大量正电荷中和红细胞表面的负电荷，减少红细胞静电排斥，形成可逆凝集，加入解聚液仅可使非特异性聚集分散。,第五章 血型与输血学检验,聚凝胺配血法,聚凝胺法：可以检出IgM与IgG两种性质的抗体，能发现引起溶血性输血反应的绝大多数抗体。,第五章 血型与输血学检验,六、凝胶卡式检测法,是微柱凝胶技术与上述所有技术相结合的产物1986年由法国人Dr.Yves Lappierre发明1994年获得美国FDA认证，目前在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床,第五章 血型与输血学检验,过滤介质：颗粒直径26-103 nm的葡聚糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过缓 冲 液：LISS（加或不加抗血清）,凝胶卡式检测法的工作原理,第五章 血型与输血学检验,凝胶卡式检测法的工作原理,将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心后观察凝集的红细胞，被阻挡在微柱中凝胶的上部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳性游离的红细胞，挤过装有过滤介质的微柱到达底部，证明未发生凝集，判断凝集反应阴性,第五章 血型与输血学检验,交叉配血中可能出现的一些问题,1.缗钱状形成：常见于多发性骨髓瘤，巨球蛋白症、霍奇金病2.试验结果不相容：显示有未检明同种抗体存在3.离心力不当：造成假阴性和假阳性4.水浴箱温度不正确5.结果溶血，把血清灭活补体后再试验,第五章 血型与输血学检验,标签和发血,配血单上，均需写上受血者姓名、床号、ABO及Rh血型，献血者姓名、编号、 ABO及Rh血型等，反复核对输血申请单和血液的标签正确无误，交叉配血试验结果的判断，发出血液的血型、名称、数量，注明发血时间，签名或盖章，输血前检查试验是一项具有高度科学性和责任性的工作，熟练和灵活应用血清学试验原理和技术，对试验结果能给予全面、细致观察和分析,第五章 血型与输血学检验,第三节 白细胞血型,1. 包括红细胞血型抗原2.白细胞本身所特有的血型抗原3.人类白细胞抗原（HLA）,第五章 血型与输血学检验,一、HLA系统基因、抗原结构,HLA基因型: 位于6号染色体短臂6p21.3区域。HLA抗原 .HLA-类分子：有核细胞 .HLA-类分子：抗原提呈细胞,第五章 血型与输血学检验,HLA抗原临床应用,HLA多态性的研究;器官和骨髓移植前组织相容性配型;亲子鉴定;HLA与某些疾病的关联;遗传学方面。,第五章 血型与输血学检验,二、HLA系统抗原的检测方法,.HLA血清学技术(微量淋巴细胞毒试验)分型血清中含有的抗特定HLA抗原的细胞毒抗体与待检淋巴细胞膜表面的HLA抗原结合后，在补体的参与下损伤细胞膜，经伊红或台盼蓝染色后，观察细胞是否被染色，了解细胞损伤、死亡的情况。,第五章 血型与输血学检验,.HLA的分子生物学检测：PCR-SSP（ PCR序列特异性引物）PCR-SSO（ PCR序列特异性寡核苷酸探针）PCR-RFLP（PCR限制性片段长度多态性）PCR-SBT（PCR-直接测序分型 ）,第五章 血型与输血学检验,三、粒细胞血型,分布：中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞。分类：.HNA-1抗原：目前发现的唯一具有多态性的粒细胞抗原系统。.HNA-2抗原：其中HNA-2 a具有临床意义。 .HNA-3抗原：其中HNA-a表达于淋巴细胞、血小板、内皮细胞、脾脏、肾脏、胎盘细胞，是粒细胞聚集因子，与输血相关性肺损伤相关。,第五章 血型与输血学检验,(一)粒细胞抗原抗体检测方法,1. 血清学方法：a.粒细胞凝集试验b.单克隆抗体特异性粒细胞抗原捕获试验c.粒细胞免疫荧光试验d.流式细胞术2. DNA分型技术: PCR-RFLP、PCR-SSP等。,第五章 血型与输血学检验,（二）粒细胞抗体的临床应用,.新生儿同种免疫粒细胞减少症2. 非溶血性发热性输血反应3. 输血相关性肺损伤4. 粒细胞输注无效5. 自身免疫性粒细胞减少症,第五章 血型与输血学检验,第四节 血小板血型,第五章 血型与输血学检验,HPA,血小板特异性抗原：血小板独特的遗传多态性血小板相关抗原：组织相容性抗原和红细胞血型相关抗原，吸附于血小板表面,第五章 血型与输血学检验,HPA血型系统,HPA-1HPA-2HPA-3HPA-4HPA-5其他,第五章 血型与输血学检验,一、血小板同种抗体,同种血小板抗体一般由输血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而产生。最常见的抗体是HPA-1b和5b抗体。,第五章 血型与输血学检验,二、血小板血型抗原和抗体的临床应用,1.新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜 2.输血后紫癜 3.血小板输注无效,第五章 血型与输血学检验,第五节 新生儿溶血病,第五章 血型与输血学检验,一.ABO新生儿溶血病,ABO-HDN是由于母婴血型不合，母体的IgG抗A(B)经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。,第五章 血型与输血学检验,AB0溶血症的发生不是由于母亲或新生儿本身的血液有问题，而是因为母婴血型不合；例：如果胎儿的血是A（B）型，O型母体IgG抗A（B）通过胎盘绒毛膜进入胎儿血液和胎儿红细胞上的A（B）抗原起作用，使胎儿红细胞破坏和溶血；胎儿出生即出现新生儿ABO溶血症。,第五章 血型与输血学检验,ABO血型不合：母：“O”型，胎儿为“A”或“B”型常见。常发生在第一胎。 大量溶血贫血（胎儿水肿） 贫血髓外造血肝脾肿大 溶血未结合胆红素大量产生黄疸（胆红素脑病）,第五章 血型与输血学检验,临床表现,一、黄疸 二、贫血 三、肝脾肿大 四、胆红素脑病 五、胎儿水肿,第五章 血型与输血学检验,二.Rh血型引起的新生儿溶血,第五章 血型与输血学检验,Rh抗体主要是不完全抗体IgG，其分子小能透过胎盘例:,分娩时,胎儿RBC,胎儿(Rh阳性),胎盘,胎儿红细胞发生凝集和溶血(新生儿溶血),第二次怀孕：,第一次怀孕：,诱导孕妇(Rh阴性)产生抗D抗体,胎儿(Rh阳性),第五章 血型与输血学检验,三.实验室检查,一、溶血证据： 二、母婴血型不合三、血清特异性血型抗体检查（确诊） 1母血清抗体：间接抗人球蛋白试验 患儿红细胞（致敏）：直接抗人球蛋白试验（确诊Rh） 2抗体释放试验（确诊ABO） 3血清游离抗体,第五章 血型与输血学检验,实验室检查,直接抗人球蛋白试验游离试验:是检测新生儿血清中的血型抗体。释放试验:与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。,第五章 血型与输血学检验,第六节 临床输血,一、全血输血,全血适应证全血可用于急性大量血液丢失可能出现低血容量休克患者； 或存在持续活动性出血，估计失血量超过自身血容量30%的患者（我国临床输血技术规范规定）。,第五章 血型与输血学检验,全血并不全,血液离开血循环要与抗凝保存液混合，发生了“保存损害”保存液是针对红细胞设计的，4只能保存红细胞，对其他成分无保存作用血小板离体后需要在222振荡条件下保存白细胞中的粒细胞是短命细胞，离体后8小时功能丧失，很难保存凝血因子和不稳定，需要在18以下保存,第五章 血型与输血学检验,全血成分保存血液中的各种主要成分在4摄氏度条件下，在ACD或CPD保养液中的存活时间红细胞 CPD中保存28天， ACD中21天血小板 12小时大部分失去活性白细胞 8小时后丧失功能V或VIII因子 1-3天丧失50%以上的活性,第五章 血型与输血学检验,可不输全血的，不输全血,(1)大部分病人主要缺乏的是血液中的某种成分。(2)血液中的各种成分代偿能力不同。(3)大量输全血可使循环超负荷。 全血中的血浆可扩充血容量；输血量过 大或速度过快可发生急性肺水肿； 老年人、婴幼儿及危重患者危险性更大。,第五章 血型与输血学检验,（4）全血输入越多， “保存损害”产物越多，患者肝肾功 能代谢负担越重。 （5）全血容易产生同种免疫，不良反应多。全血中有多种复杂的血型抗原；刺激机体产生相应抗体（同种免疫）；全血输入越多，不良反应也越多。（6）全血内所含的成分不浓、不纯和不足一个治疗剂量，疗效差。（7）全血是宝贵的社会资源，盲目输注全血是对血源的浪费。,第五章 血型与输血学检验,全血和红细胞输注优缺点比较 全 血 红 细 胞提高携氧能力兼扩容 以较小的容量提高携氧能力必须同型输血 同型或相容含全部抗凝保存液 抗凝剂随血浆除去血浆中含较多钾、氨、乳酸 “保存损害产物”随血浆除去含较多白细胞、血小板碎屑 白细胞、血小板碎屑较少不能用于分离其它血液成分 一血多用,第五章 血型与输血学检验,二、成分输血,概念：将血液各种细胞、血浆、蛋白分离提纯按需输用。适应证1补充血容量 2提高携氧能力3补充凝血因子，纠正出血4调节免疫机能，提高机体抵抗力 5维持胶体渗透压 6有害物质的排除（换血或血浆置换） 禁忌证: 无明确的输血适应证。,第五章 血型与输血学检验,成 分 输 血,成分输血就是把血液中的各种细胞成分、血浆和血浆蛋白成分用科学的方法加以分离、提纯，分别制成高纯度、高浓度、低容量的制剂，根据临床病情需要缺什么、补什么的原则输用。三级甲等医院成分输血率要求大于70%。,第五章 血型与输血学检验,成分输血的优点,1制剂容量小，纯度高，治疗效果好2针对性强，不良反应少3减少输血传播性疾病的发生4便于保存，使用方便5一血多用，节约血液资源,第五章 血型与输血学检验,第五章 血型与输血学检验,红细胞悬液,每单位200ml全血尽量移去血浆，加入50ml的添加剂，由于大部分抗凝剂和“保存损害产物”随血浆除去，所含白细胞和血小板碎片比全血少，故不良反应发生率也大为减少。,添加剂配方有多种，主要成分是： 1添加了红细胞的营养剂（葡萄精、腺膘呤）； 2添加了红细胞膜的稳定剂（甘露醇或蔗糖）。,第五章 血型与输血学检验,红细胞悬液,适应证 适用于临床各科输血，以提高携氧能力。失血性贫血溶血性贫血红细胞生成障碍引起的贫血,第五章 血型与输血学检验,每单位总量为110-120ml，RBC+30ml血浆+15ml抗凝剂，该制品具有与全血同样的携氧能力，而容量只有全血的一半，同时抗凝剂、乳酸、钾、氨比全血少，使之用于心、肾和肝功能不全的患者更为安全。,浓缩红细胞,适应症同悬浮红细胞,第五章 血型与输血学检验,该制品已去除80%以上的白细胞和99%的血浆，保留了至少70%的红细胞，在洗涤中去除了K+、氨、乳酸、抗凝剂和微小凝块等，血小板也随血浆去除，应用本制品可明显减少输血不良反应的发生率。,洗涤红细胞,将全血或添加剂红细胞在无菌条件下用生理盐水洗涤36次（常规3次），最后加50ml生理盐水即制成。,第五章 血型与输血学检验,输入全血或血浆后发生过敏反应的患者自身免疫性溶血性贫血患者高钾血症及肝、肾功能障碍需要输血者由于反复输血已产生白细胞或血小板抗体引起的输血发热反应的患者,洗涤红细胞适应症,第五章 血型与输血学检验,血 浆,1.新鲜冰冻血浆： 采出的全血于68小时内将血浆分出，并迅速在30条件下冰冻成块制成。该制品几乎含有全部凝血因子。 100ml新鲜冰冻血浆含总蛋白约6g、白蛋白约3.5g、 纤维蛋白原约0.3g、其他凝血因子(、 、)约 70100单 位。 保存期为一年。,第五章 血型与输血学检验,单纯凝血因子缺乏的补充(无相应凝血因子浓缩剂时)，因大量输血伴有凝血功能障碍而出血者；肝病患者伴有凝血功能障碍者口服香豆素类抗凝药物过量引起出血者；血栓性血小板减少性紫癜；治疗性血浆置换术；大面积烧伤；,适应症,第五章 血型与输血学检验,2.普通冰冻血浆： 普通冰冻血浆中缺乏不稳定凝血因子（如因子、因子）。,-200C 以下可保存5年 与FFP主要区别是缺少不稳定的凝血因子和，适应症为用于因子和以外的凝血因子缺乏者的替代治疗。,第五章 血型与输血学检验,冷沉淀,以400ml全血分离出来的血浆制备的冷沉容量为20-30ML，含有因子80IU，含纤维蛋白原200-300mg。,冷沉淀是将新鲜冰冻血浆（FFP）置4条件下融化，有一部分不易融解的白色沉淀物即为冷沉淀。,第五章 血型与输血学检验,冷沉淀中5种成分丰富的因子血管性血友病因子纤维蛋白原纤维结合蛋白因子 冷沉淀用于：儿童血友病甲,血管性血友病,先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症患者,也用于手术后出血,严重外伤及DIC等患者的治疗.,冷沉淀适应症,第五章 血型与输血学检验,血小板,单采血小板：每袋200ml250ml，含血小板2.51011，RBC8109， WBC5108。特制血小板保存袋222震荡保存，可保存5天。冰冻血小板：单采血小板或浓缩血小板混悬液中加入二甲基亚砜，80 冰冻保存一年。血小板回收率70%，急诊需要又没有单采血小板或浓缩血小板时应用。,第五章 血型与输血学检验,（1）血小板减少，伴有严重出血者；（2）血小板功能异常，伴有严重出血者，如血小板无力症、阿司匹林过量等；（3）预防性血小板输注。占全部血小板输用量的80%以上.目的是预防颅内出血等严重出血合并症。,血小板输注适应症,第五章 血型与输血学检验,新一代成分输血,非替补性输血治疗性成分输血造血干细胞移植,第五章 血型与输血学检验,三、自体输血,概念：采集自身血液或血液成分，经保存处理需时回输。优点 1. 避免输血传播的疾病和不良反应。 2. 避免同种异体输血产生的同种免疫反应。 3. 反复放血可刺激红细胞再生，促进患者术后造血速度加快。 4. 避免异体血液对受血者免疫功能的抑制。 5. 缓解血源紧张的矛盾。,第五章 血型与输血学检验,自体输血种类,根据血液来源和保存方法主要分为： 1.贮存式自体输血 2.稀释式自体输血 3.回收式自体输血,第五章 血型与输血学检验,六、输血不良反应,.概念：.分类：.按输血反应发生的时间，分为急性反 应和迟发性反应。.按输血反应发生的机制，分为免疫性反应和非免疫性反应。,第五章 血型与输血学检验,七、常见输血不良反应,1. 溶血反应：（1）急性溶血性输血反应（AHTR），24h内，多为血管内溶血， （2）迟发性溶血性输血反应（DHTR），2周内，多为血管外溶血， 2. 非溶血性发热性输血反应（FNHTR）3. 过敏反应4. 输血相关性移植物抗宿主病（TA-GVHD），辐照血液预防发生5. 输血相关性急性肺损伤（TRALI）,第五章 血型与输血学检验,八、输血传播疾病,病毒性疾病: 1. 病毒性肝炎:乙肝、丙肝 2.获得性免疫缺陷综合征（艾滋病） 3.巨细胞病毒感染梅毒感染:寄生虫：疟疾、弓形体病细菌感染性疾病,第五章 血型与输血学检验,现行对策,推行无偿献血严格筛选血液提倡科学合理用血社会保障制度根本对策血液制品病毒灭活血液制品替代品人造血的研究,第五章 血型与输血学检验,第七节 发展趋势,输血领域的新观点 1.全血不全 2.急性出血并不需要补充全血 3.输注保存血比新鲜血更安全 4.输血对病人并不是好处多、害处少 5.去白细胞输血 合理用血和成分输血 自体输血 造血干细胞移植提高输血安全性,