羧肽酶A终极版ppt课件.ppt

羧肽酶,A,羧肽酶简介,羧肽酶是一种消化酶。可专一性地从肽链的C端开始逐个降解，释放出游离氨基酸的一类肽链外切酶。以酶原形式存在于生物体内。,3,羧肽酶,羧肽酶C：专门水解C端倒数第二位是Pro形成的肽键,羧肽酶B：可以切割C端的Lys或Arg,羧肽酶A：切割C端除Lys、Arg、Pro的氨基酸,羧肽酶：作用于任何一个C-末端残基,2022/11/24,羧肽酶A生理功能,羧肽酶A结构,1,2,羧肽酶A金属配位环境,3,羧肽酶A催化机理,4,CONTENTS,目 录,5,羧肽酶A（Carboxypeptidase A）,羧肽酶A的结构特点,2022/11/24,羧肽酶A（Carboxypeptidase A）一级结构,7,羧肽酶A（Carboxypeptidase A）二级结构以及跟高级结构（软件示意）,九个-螺旋，占蛋白质结构35.83%；呈现筒形包含在蛋白质外侧，且在螺旋中每相隔1-2个氨基酸残基便出现一个赖氨酸或者是其他的亲水性氨基酸；九个-折叠，占蛋白质结构14.66%，位于蛋白质的内部；一个二硫键，是半胱氨酸138和161位键合而成。,羧肽酶A（Carboxypeptidase A）,羧肽酶A的生理功能,更易于水解具有芳香族侧链和大脂肪侧链的羧基端残基。比如酪氨酸、苯丙氨酸等.释放除脯氨酸、羟脯氨酸、精氨酸和赖氨酸之外的所有C末端氨基酸.,9,羧肽酶A反应方程式,10,羧肽酶A（Carboxypeptidase A）,羧肽酶A的金属配位环境,Zn2+与His196，Glu72和His69结合。还有一个留给了水分子或者羟基阴离子。,11,羧肽酶A（Carboxypeptidase A）,羧肽酶A的催化机理,活性部位：Glu270，Arg127、145，Zn2+以及Tyr248；水解一般分为四个步骤,步骤一：,酶的Arg145残基的带正电的胍基和底物所带的负电荷的碳末端静电作用相互吸引，底物进入酶空腔口袋之中；,步骤二：,氢键的形成：底物敏感肽键上-NH-基上氮原子与酶得Tyr248的-OH之间形成氢键；,步骤三：,底物肽键上的羰基挤走和锌配位的水分子而与锌离子配位；锌离子配位后使羰基极化，使羰基碳原子电正性更强，更加易于受到亲核进攻,步骤四：,底物末端羰基碳原子通过插入一个水分子与酶的Glu270侧链以氢键连接。,16,羧肽酶A（Carboxypeptidase A）,羧肽酶A的金属Zn在生理功能中的作用,被裂解的肽键的羰基指向Zn2+，使C=O键比正常的更加极化，使得羰基C原子更易接受亲核进攻。,Zn2+处在非极性环境促进了诱导偶极子的产生，这增加了它的有效电荷。,Zn2+使肽键产生张力作用，从而促进底物水解,17,Zn能否被同晶置换？,实验表明：Zn2+能够被Co2+、Fe2+置换而保持酶的活性。被Co2+置换时，酶的活性得到进一步增强；被Mn2+、Cd2+置换时，酶的活性下降。Ni2+、Pb2+、Hg2+置换时仅仅保持部分活性。没有金属辅基的脱辅酶无活性。,摘自：人羧肽酶A1_抗精浆单链抗体_肽酶A1融合蛋白的表达及活性测定_郑佩婵,18,谢谢观看！Thank you,敬请提问.,