网织红细胞检查的临床意义ppt课件.ppt
网织红细胞检查的临床意义,网织红细胞介绍,网织红细胞（Reticulocyte，Rtc）是红细胞的未成熟阶段，是反映骨髓红系造血功能及判断贫血和相关疾病疗效的重要指标。骨髓中红细胞系统的增生发育过程是：多能以干细胞单能干细胞原始红细胞早幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞网织红细胞成熟红细胞。从原始红细胞增殖到晚幼红细胞阶段共分裂34次，约需72小时，红细胞数由一个变为8一16个，细胞核由大变小而浓缩，胞浆中含血红蛋白逐渐增多。,晚幼红细胞以后细胞即不再分裂，发育过程中核被排出而成为网织红细胞。网织红细胞含有少量核糖核酸RNA)，用煌焦油蓝染色时成网状故名网织红细胞。网织红细胞进一步成熟，RNA消失而为成熟红细胞。从晚幼红细胞发育到成熟红细胞约需48小时，成熟红细胞的寿命约为120天。在正常情况下骨髓中有核红细胞并不释放至血循环，只有网织红细胞和成熟红细胞才释入血中。因此，检查末梢血中网织红细胞数，可以推知骨髓生红细胞的情况。,过去，计数Retc十分麻烦费时也不易数准，现在，部分血液分析仪具有自动检测网织红细胞的功能。仪器最大的优点之一是随时可计数Retc,十分便利，而且计数的细胞多，故很准确。该类仪器对Retc可提供6个参数，包括网织红细胞总数（Retic#）、网织红细胞百分比（Retic%）、网织红细胞平均体积（MCVr）、单个网织红细胞平均血红蛋白浓度（CHCMr）、网织红细胞分布宽度（RDWr）、单个网织红细胞血红蛋白含量（CHr）等，其中意义最大的，除了总数，百分比以外，最重要的网织红细胞血红蛋白含量（CHr）参数。,正常人外周血中甚少，如增加，表示红系统增生（如急性溶血，多数溶血性贫血和其他增生性贫血），如贫血仍不见增生，可能是重型再障。抗贫血治疗后明显上升，表示治疗有效，反之效果欠佳。故网红的总数或百分比对贫血的临床诊断及疗效观察非常有价值。是血液最常做的项目之一。,网织红细胞计数的方法,目前检测网织红的方法有传统的显微镜目测法、网织红细胞计数仪、流式细胞仪、多参数血细胞分析仪四种方法。传统的显微镜目测法：人工计数10002000个红细胞，网织红细胞所占百分数。受主观因素影响较大，结果与染色部位、染色时间、染料与血液的比例有关，准确性较差。网织红细胞计数仪：网织红细胞计数仪是专门进行网织红细胞测定的仪器，可自动染色、自动分析、自动打印各阶段网织红细胞分布图，结果准确，但仪器昂贵且单一难以广泛应用。,（3）流式细胞仪：流式细胞仪将红细胞染色后将含有RNA的网织红细胞计数，但它不能分析其成熟程度。多参数血细胞分析仪：为网织红细胞计数提供了先进的测量手段，这类仪器采用荧光染色和激光测量的原理，不但能客观准确计数、测量网织红细胞，而且还能根椐其RNA含量，估计网织红细胞的成熟程度，其最大的优势是对网织红细胞分群，客观地将网织红细胞分成高荧光强度网织红（HFR：属早期网织红），中荧光强度网织红（MFR：属中期网织红），低荧光强度网织红（LFR：属晚期网织红），同时还能提供网织红细胞中的血红蛋白含量（CH-r）等参数，这些指标对临床及科研颇有价值。,网织红细胞计数校正,网织红细胞计数一般以占外周血红细胞（RBC）百分数表示，因此易受贫血程度的影响。矫正方法有两种：网织红细胞百分数与红细胞绝对数乘积即绝对网织红细胞计数（正常范围:2400084000/立方毫米）。另一消除贫血程度影响的方法是，网织红细胞百分数与实际红细胞压积的积再除以正常红细胞压积（45）。值得注意的是，上述矫正方法往往会使网织红细胞计数低于实际值，因此如果观察值已较低，则矫正值无意义。矫正仅用于网织红细胞百分数增高时。,各型网织红细胞（煌焦油蓝活体染色）丝球型（a）、网型（b）、破网型（c）、点粒型（d）网织红细胞,手工计数和流式细胞仪计数区别,网织红细胞计数的传统方法是使用新亚甲基蓝染料，染色涂片后，光镜下计数。但此方法费时，且由于只计数1000个细胞，因而存在固有的取样误差。使用流式细胞术方法进行网织红细胞计数，与传统的新亚甲基蓝方法相比，存在很多优势。使用流式细胞术，可以检测上万个细胞，具有很好的取样精确性。由于使用的是细胞悬液，可以消除涂片时的分布误差。同时，它还具有省时、操作简便等优点。,网织红细胞计数参考范围及影响因素,成人：绝对值（2284）109/L.百分率：0.0050.015（仪器法）。儿童：百分率0.030.06（仪器法）。荧光染色激光流式细胞技术：LFR（低荧光强度比率）：0.8130.909（仪器法）。MFR（中荧光强度比率）：0.0720.154（仪器法）。HFR（高荧光强度比率）：0.0090.043（仪器法）。【影响因素】标本应严格使用EDTA-K2抗凝静脉血，不能用肝素或枸橼酸盐抗凝；抽血量1ml，抽血后立即轻轻颠倒混匀，注意切勿用力振摇，以免造成标本溶血。,鉴别贫血,网织红细胞计数在诊断正常细胞贫血，或仅蛋白、转铁蛋白结果可以的小细胞时尤为重要；大细胞贫血伴网织红细胞增多，常提示用叶酸或维生素B12治疗有效。,贫血的分类和诊断鉴别,贫血最常发生在血液病。可能是原发疾病，但更多的是贫血仅为疾病的一个症状。因为贫血可由各种原因引起，贫血的分类应结合临床和实验室研究资料一步一步进行。 根据病理学可将贫血分为骨髓中红细胞成长下降、红细胞破坏过多、或失血。网织红细胞计数与骨髓中红细胞成长活性有关。,网织红细胞降低的原因,网织红细胞降低与红细胞成长降低和无效红细胞成长有关。网织红细胞减少的原因为： 1骨髓幼红细胞和造血细胞由脂肪细胞取代。 2骨髓中正常造血由肿瘤细胞或成纤维细胞取代。 3骨髓内幼红细胞的无效成长：由于成熟缺陷和幼红细胞在骨髓腔内死亡所致。 为了明确最后诊断，骨髓检查对贫血分类十分必要。,网织红细胞增加的原因,网织红细胞数目的增加与红细胞成长活性增加有关。红细胞破坏过多的病人体内可见网织红细胞计数增加，即在溶血性贫血、或脾功能亢进病人，贫血病人骨髓增生对治疗的反应。 1. 造血细胞减少 再生障碍性贫血 2幼红细胞造血减少 纯红细胞再生障碍性贫血 3骨髓被取代 急性白血病 霍奇金病 非霍奇金淋巴瘤 多发性骨髓瘤 转移性肿瘤 骨髓纤维化，骨髓硬化,4幼红细胞成熟障 碍和髓内死亡 恶性贫血 地中海贫血 骨髓增生异常综合征 网织红细胞增多: 鉴别诊断范围 1.溶血性贫血 2.脾功能亢进 3.贫血再生阶段,细胞抑制药和射线治疗,流式细胞仪测定网织红细胞的敏感性可用于检测癌症病人，可得知药物和放射治疗对骨髓的细胞毒副作用，特别是红系造血的影响。迄今为止，这些方法还没有评价红细胞成长的合适方法。用顺铂长期治疗的卵巢癌病人网织红细胞数增加。网织红细胞数增加常发生在血红蛋白量下降之前。网织红细胞自动检测可作为早期识别病人产生贫血时的一个有用的潜在指标。,骨髓移植,在自体和异体骨髓移植中，红细胞成长重建是移植过程中的一个重要且独立的问题。迄今为止，网织红细胞计数因其人工计数技术的不准确性而受到限制。外周血粒细胞增加的检测是移植开始的最早的实用方法。但是，绝对粒细胞数可因病人并发如感染、移植物抗宿主病而受误导。预防性血小板输注掩盖了移植后早期血小板成长情况的检测。网织红细胞计数是用于检测骨髓中血细胞恢复的另一个非独立参数。,通过流式细胞仪的网织红细胞分析，可准确评价自体和异体骨髓移植后红细胞成长的恢复情况。在骨髓移植第21天，网织红细胞数大于15109L,表明移植获得成功。感染和输血对网织红细胞的生长趋势都没有明显的影响。,在第21天网织红细胞计数小于15109L,则中性粒细胞和血小板的生长不良，表明骨髓移植失败,要进行第二次移植，外周血干细胞输注,或重组造血生长因子的应用。因此，网织红细胞检测是评价自体或异体骨髓移植另一个客观的参数。,总结,网织红细胞计数可直接检测红细胞成长活性，是骨髓活性的重要指标,能对贫血进行分类、鉴别诊断和指导治疗。流式细胞仪自动计数网织红细胞提高了诊断的敏感性，能确切地检测动态变化，这在以前是不能检测的。,谢谢！,
